微生物重要技术和资料.docVIP

壹、微生物 一、常用试剂和显示剂 1．3%酸性乙醇：浓盐酸3ml、95%乙醇97ml。 2．1mol/L NaOH溶液：NaOH 40g、蒸馏水1000ml。 3．溴甲酚紫指示剂：溴甲酚紫0.04g、0.01mol/L NaOH 7.4ml、蒸馏水92.6ml，溴甲酚紫PH 5.2~6.8，颜色由黄变紫，常用浓度0.04%。 4.1.6%溴甲酚紫乙醇液：溴甲酚紫1.6g、95%乙醇50ml、蒸馏水50ml。 5.溴麝香草酚蓝指示剂：溴麝香草酚蓝0.04g、0.01 mol/L NaOH 6.4ml、蒸馏水93.6ml，溴麝香酚草蓝PH6.0~7.6，颜色由黄边蓝，浓度0.04%。 6.甲基红试剂：甲基红0.04g、95%乙醇60ml、蒸馏水40ml，先将甲基红溶于95%的乙醇中，然后加入蒸馏水即可。 7.伏普试剂： a.5%x-奈酚无水乙醇溶液：x-奈酚5 g、无水乙醇100ml。 b．40% KOH溶液：KOH 40g、蒸馏水100ml。 8.吲哚试剂：对二甲基氨基苯甲醛2g、95%乙醇190ml、浓盐酸40ml。 二、染色剂 1.齐氏石炭酸复红染色液： A液：碱性复红0.3g、95%乙醇10ml。 B液：石碳酸5g、蒸馏水95ml。 2.吕氏碱性美兰染色液： A液;美兰（甲烯、次甲基蓝、亚甲基蓝）0.6g、95%乙醇30ml。 B液：KOH 0.01g、蒸馏水100ml。 分别配制A、B液，配好后混合均匀即可用。 3.革兰氏染色液：（紫色为阳，红色为阴） a.草酸铵结晶紫染色液：A液：结晶紫2g、95%乙醇20ml，B液：草酸铵0.8g、蒸馏水80ml，将两液充分混合后静止48小时后使用。 b.路哥氏碘液：碘1g、碘化钾2g、蒸馏水300ml，先将碘化钾加入少量水中，在加碘，最终标到300ml即可。 C．95%乙醇液。 d.番红液：番红2.5g、95%乙醇100ml，去其复合液10ml到80ml蒸馏水混合即可。 4.芽孢染色液：（芽孢呈绿色，孢囊以及营养体为红色） a.5%孔雀绿染色剂：孔雀绿5g、蒸馏水100ml，尽量溶解，最后过滤使用。 b.0.5%番红液：番红0.5g、蒸馏水100ml。 5.0.1%美蓝染液（观察酵母菌、放线菌用）：美蓝0.1g、蒸馏水100ml。 6.乳酸石碳酸棉蓝溶液（观察霉菌形态用）：石碳酸10g、乳酸（相对密度1.2）10ml、甘油（相对密度1.25）20ml、蒸馏水10ml、棉蓝0.02g，配置时，先将石碳酸放入水中热溶解，然后慢慢加入乳酸、甘油，最后加入棉蓝，时期溶解。 三、常用培养基 1.牛肉膏蛋白胨培养基（细菌）：牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCL 5g、琼脂15~25g、水1000ml，PH 7~7.2，121℃ 灭菌20min。 2.高氏I号培养基：（放线菌）：可溶性淀粉20g、KNO3 1g、NaCL 0.5g、K2HPO4 0.5g、MgSO4 0.5g、FeSO4 0.01g、琼脂15~20g、水1000ml，PH 7.2~7.4，先冷水溶解淀粉，再倒入沸水中，121℃ 灭菌20min。 3.察氏培养基（霉菌）：NaNO3 2g、K2HPO4 1g、kcl 0.5g、K2HPO4 0.5g、FeSO4 0.01g、蔗糖30g、琼脂15~20g、水1000ml，121℃ 灭菌20min。 4.马铃薯培养基（简称PDA）（真菌）：马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂15~20g、水1000ml，马铃薯粒煮30min，取其汁，121℃ 灭菌30min。 5.麦芽汁琼脂培养基： a.取麦根为麦体长两倍的麦芽，烘干，并将1份干麦芽加4份水，65水浴糖化3~4小时，其程度可用碘液检测。 b.过滤糖液后若浑浊，可以加蛋清液（调制到无泡的蛋清水），然后在过滤。 c.将滤液稀释到波美5~60，为6.4，加琼脂2%即可，121℃ 灭菌20min。 6.麦氏琼脂培养基（酵母菌）：葡萄糖1g、KCL 1.8g、酵母侵膏2.5g、醋酸钠8.2g、琼脂15~20g、蒸馏水1000ml，113℃ 灭菌20min。 7.缓冲葡萄糖肉汤培养基：蛋白胨10g、Na2HPO4 2g、葡萄糖1g、 NaCL 3g、肉侵液（0.5%牛肉膏）1000ml，药如肉液中加热溶解，调至PH7.4，121℃高压蒸汽灭菌30min。 8.合成培养基：(NH4)3PO4 1g、KCL 0.2g、MgSO4--7H2O 0.2g、豆芽汁10ml、琼脂20g蒸馏水1000ml, PH为7，加12ml%的溴甲酚紫（PH2~6.8）作指示剂，121℃ 灭菌20min。 9.蛋白胨水培养基：蛋白胨10g、NaCL 5g、蒸馏水1000ml, PH 7.6, 121℃ 灭菌20min。 10.豆芽汁培养液：