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荧光定量RT_PCR检测禽白血病病毒方法的建立及应用.pdf
试验研究
－25－ 中国动物检疫 年第 卷第 期
2008 25 9
荧光定量RT-PCR 检测
禽白血病病毒方法的建立及应用
李佳桃1 3 1 2 1
崔宝玉 岳 华 李明义 汤 承
， ， ， ，
西南民族大学生命科学与技术学院 成都 四川 ； 中国动物卫生与流行病学中心山东 青岛 ； 山
(1. , 610041 2. , 266032 3.
东畜牧兽医职业学院，山东潍坊 266101)
摘 要； 基因是禽白血病病毒 （ 的群特异性基因 根据 中登录的 基因的保守序列
gag ALV ） ， GenBank gag
设计合成了 对引物 建立了基于 模式的检测禽白血病病毒的实时荧光定量 方
（E46390 ）, 1 ， SYBR Green I RT-PCR
法 该方法只对目的基因有扩增 对其它无关病毒核酸无特异性扩增 扩增效率为 ；在 2 7 拷贝的
。 ， ； 94.6% 8.2×10 ～8.2×10
范围内有很好的线性关系 最低可检测 个拷贝的病毒核酸 与普通 方法相比 灵
（ ， ）； ， ，
Y=3.46X+31.8 r=0.9995 82 PCR
敏度高出 倍 组内 为 组间 为 对 例临床疑似样本的检出率为
1000 。 CV 0.28%～1.45% ； CV 2.13%～3.84% ； 151 54.9%
随机选择 份阳性样本 产物克隆测序 结果证明扩增片断为
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