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河南省猪圆环病毒病流行病学调查及病原鉴定.pdf
22 of Medicine
中目兽医杂志2007年(锥43卷)第9期 Chinese』oIlrtial
Veterinary
河南省猪圆环病毒病流行病学调查及病原鉴定
王江辉,任广志,陈 陆,任向阳,刘 矿,董加才,王川庆
(河南农业人学牧医I’程学院疫病检测中心,河南郑州450002)
6005(2007)09—002202
中图分类号:$858.285.3 文献标识码:H 文章编号:0529
eireovirus
猪围环病毒Ⅱ型(Porcine 2, 5
type 系为50pL。反应成分如下:10×BuffertLL,dNTPs
PCV2)是近年来新发现的猪的一种敛病病原.主要 4 ftL,模板DNA10}-L,
5”L,MgCl2tH,,引物各1
引起断奶猪多系统衰竭综合缸(PostweaningrTaq酶0.5pL.力u超纯水至50I*L,然后瞬时离心,
J。自
muhisystemicwastingsyndrome,PMWS)E1进行PCR扩增。94C预变性3min,随后作如下循
1991年在加拿大首次报道“o以来,世界上许多国家环:94℃变性45s,58‘C遐火45s,72℃延伸45s.共30
和地区相继报道此病的发生和流行。“,我国在2001个循环。循环结束后72C延伸8min,对PCR产物经
年报道了-此病的发生o。,并做了分离鉴定。为了r解 1%琼脂糖凝胶电泳榆查PCR扩增产物并拍照。
河南省的流行情况,本研究室应用ELISA法进行了1.2.6
血清学检测,并用PCR法做r病原分离鉴定。 琼脂糖凝胶电泳,切下含有日的条带的凝胶,用
1材料与方法 DNA快速凝胶回收试剂盒【旦|收。在20I。反应体系
1.1 主要材料①待检血清:来自{可南省10个地区 2.0 Buffe缓冲液2.0
中加入回收产物1 pL,10×H
21个貉场的6j1份血清;诊断试剂:猪圆环病毒酶联 1.0 h
pL,EcoR pL,双蒸水5pL。在37(:酶切l
免疫诊断试剂盒(购自华中农业大学动物医学院动物 后,经l%琼脂糖凝胶电泳检查酶切片段并拍照。
病毒室,批号;②主要酶及试剂:十二烷
2结果与分析
基磺酸纳(SDS)、饱和酚,三氯甲烷、异戊醇、TaqDNA2.1 临床发病情况调查结果在渊查发病的18个
聚合酶、MgCl。、dNTP、i0×Buffer、引物合成、EcoR
规模化猪场中.除洛阳、南阳的2个猪场外,其余16个
I酶、DNA凝胶回收试剂盒和蛋白酶K等。 猪场发病猪群都为s~9周龄的保育仔猪,临床表现
1.2方法 基本一致。多数猪群在断奶后l周赢右,出现进行性
1.2.1发病情况调查20,7)5年]月至2006年1月,
消瘦,被毛粗乱,采食量F降,
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