水稻多逆境响应基因OsMsr13克隆与功能分析.pdfVIP

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第5 期 第32 卷第5 期 农业现代化研究 Vol.32 No.5 2011 年9 月 RESEARCH OF AGRICULTURAL MODERNIZATION Sept. 2011 水稻多逆境响应基因OsMsr13 的克隆与功能分析 1,2 1,2 1 1 1 杨细平 ,赵洋 ,王曼玲 ,朱玉兴 ,夏新界 (1.中国科学院亚热带农业生态研究所,亚热带农业生态过程重点实验室, 湖南长沙410125 ;2. 中国科学院研究生院,北京100049) 摘要:为了深入研究作物耐逆境胁迫的分子机制和发现新的水稻耐逆基因,采用Affymetrix 基因芯片技术与水稻表达芯片(含 51, 279 个转录本) ,分析了培矮64S 不同生长发育时期、不同组织器官全基因组在低温、干旱、高温逆境胁迫下的表达水平变化, 筛选出一批耐多逆境候选功能基因。OsMsr13 是其中一个受低温、高温与干旱诱导,在各生长发育时期与组织器官均显著上调的 基因。根据序列生物信息学分析,OsMsr13 含有7 个外显子和6 个内含子,cDNA 全长序列为1603bp,完整的ORF 为1317bp,编 码一个含438 个氨基酸残基的蛋白质;在OsMsr13 启动子区域发现多个与逆境应答相关的顺式作用元件;数据库查找和蛋白质 多序列的比对表明OsMsr13 的预测蛋白属于钙调素结合蛋白家族。为了进一步研究OsMsr13 基因的功能,通过RT-PCR 方法扩 增到包含OsMsr13 完整ORF 的cDNA 克隆,构建了含有OsMsr13 重组基因的过量表达载体pCAM-JIT-OsMsr13,并经农杆菌介 导法将重组基因导入到水稻中。转OsMsr13 株系苗期的抗逆性试验表明OsMsr13 过量表达能显著地提高水稻的耐寒性,但在抗 旱和耐高温方面,转基因植株和野生型9311 没有观察到多大差别。 关键词:水稻;逆境;基因芯片;基因克隆;基因转化 中图分类号:S511; S332 文献标识码:B 文章编号:1000-0275 (2011)05-0627-06 Cloning and Functional Analysis of a Multiple-stress Responsive Gene, OsMsr13, in Rice 1,2, 1,2 1 1 1 YANG Xi-ping ZHAO Yang , WANG Man-ling , ZHU Yu-xing , XIA Xin-jie (1. Key Laboratory for Agro-ecological Region, Institute of Subtropical Agriculture, Chinese Academy of Sciences, Changsha, Hunan 410125, China; 2. Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China) Abstract :To understand mechanisms underlying stress tolerance and discover novel stress-tolerance genes in rice (Oryza sativa L.), Ge

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