堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒PLGA微球包被技术研究.pdfVIP

297 ＼嫩y惝飞删B97 摘要 堆型艾美耳球虫是集约化养鸡场中最常见的球虫种类之一。堆型艾美耳球虫寄生于小肠、属 于中等毒力的球虫，给养禽业带来严重的经济损失。鸡球虫病主要依靠药物防治和活疫苗免疫， 由于药物的耐药性和药物残留等问题，活疫苗免疫又存在成本高、免疫要求高等缺陷，防治球虫 病急需寻求新途径。DNA疫苗的一个显著优势是刺激机体产生广泛的细胞免疫反应和持久的免 疫记忆，但裸质粒DNA疫苗注射给药方式不够方便、组织刺激性大、生产成本高；裸质粒DNA 疫苗口服免疫在实际应用时由于受到胃酸、胃蛋白酶等对抗原的裂解作用的影响，导致了质粒疫 苗的失活，产生的免疫效果较低，常须加大免疫剂量才可获得足够的免疫力。本试验以疏水性材 能成功的被PLGA包裹并发挥免疫功效。 PLGA微球，分别测定微球的形态、粒径、质粒DNA包封率、载药量和释放程度， pcDNA3．3．1E 体外分别进行模拟鸡胃液和肠液试验并且比较肌注裸质粒鸡群和口服免疫鸡群的免疫效果。结果 um。在模拟鸡的胃 显示微球的包封率，载药百分比分别是82．7％，1．89％，它的粒径80％d、于12 7．4，在模拟的鸡的肠液中，微球30d 肠液累积释放试验中，它的累积释放能力依次为pH3．0pH 累积释放81．3％，表明了微球具有一定的缓释效果。裸质粒与微球中质粒超螺旋比例差距不明显， 这表明在包被过程中的超螺旋质粒未发生降解。 ld，10d口服微球免疫组和肌注组各组织均可检测到3．1E基因，免疫后30d，口服微球免疫组各 PLGA微球免疫后不同时间 PLGA微球能在机体内释放表达且持续释放至少30d。pcDNA3．3．IE 鸡体外周血淋巴细胞转化水平和不同时间鸡外周血中IgG含量显著增高，表明口服pcDNA3—3一IE PLGA微球免疫能有效的提高雏鸡的细胞免疫和体液免疫水平。 PLGA 通过增重、病变、卵囊产量、抗球虫指数(ACI)等多项参数来对重组质粒pcDNA3．3—1E PLGA微球口服组攻虫后鸡的卵囊产量 微球免疫效果进行评价。结果显示重组质粒pcDNA3．3．1E 坏，增强免疫应答。 关键词：鸡；堆型艾美耳球虫；PLGA微球：包被技术；免疫 The PLGAmicrobaHoonscoated of3-1ErecombinantofEimeria Technologystudy acervulina liyun Author：Chang Jian-hua Professor：Qin Medicme Major：PreventiveVeterinary Abstract The ratesofcoccidiosiscausedE．acervulinaintheintensivechicken prevalence by farmisthe ca