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第一章 绪论 分子生物学是从分子水平上研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。 它是从生物化学,遗传学,微生物学和细胞生物学等学科融汇发展而派生出来的边缘学科。 第一节 分子生物学和医学分子生物学的研究范围 一、核酸的分子生物学 包括核酸/基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译,核酸存储的信息修复与突变,基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等 二、蛋白质的分子生物学 研究执行各种生命功能的主要大分子——蛋白质的结构与功能。 三、信号转导的分子生物学 研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。 第二节 分子生物学发展简史 一、准备和酝酿阶段 ㈠确定了蛋白质是生命现象的物质基础 ㈡确定了DNA是生物遗传的物质基础 二、现代分子生物学的建立和发展阶段 ㈠中心法则的建立 ㈡对蛋白质结构和功能的进一步认识 三、初步认识生命本质并开始改造生命的深入发展阶段 ㈠基因工程技术的建立 ㈡基因组研究的开展 ㈢基因表达调控机制的揭示 ㈣信号转导机制研究的深入 第三节 分子生物学与其他学科及医学的关系 一、分子生物学与其他学科及现代医学相辅相成 二、分子生物学促进中医药研究 ㈠分子生物学在中医基础理论研究中的应用 ㈡分子生物学在中药研究中的应用 第二章 从核酸到基因组 第一节 核酸的分子组成 一、碱基(base) 二、戊糖 三、核苷(nucleoside) 和核苷酸(nucleotide) 第二节 DNA的结构 一、DNA的一级结构 二、DNA的二级结构⒈ 右手双螺旋结构 DNA双螺旋学说的要点 1)两条链沿逆平行方向伸展,围绕同一中心轴盘绕呈右手双螺旋。 2)主链在双链的外侧,侧链在双链的内侧。 3)两条链之间的碱基相互配对,配对原则为A-T,G-C。故A/T=1, G/C=1,A+G/T+C=1。 4)螺旋每上升一圈需10对碱基,螺距为3.4nm。 5)双螺旋的稳定靠氢键和碱基堆砌力。 ⒉ 左手双螺旋结构 ⒊ 十字结构 ⒋ 三股螺旋结构 影像重复序列 三、DNA的三级结构 ㈠闭环双链DNA形成超螺旋结构 一些细菌和病毒的DNA分子可形成封闭环状,并多扭曲成麻花状的超螺旋结构。 ㈡真核生物细胞核DNA形成染色体结构 ⒈ 染色体的组成 主要化学成分: DNA、RNA、组蛋白和非组蛋白。 组蛋白与DNA的含量之比接近1:1,是染色体的稳定成分。属于碱性蛋白质,有5种,即H1、H2A、H2B、H3和H4。 非组蛋白是酸性蛋白质,协助启动DNA复制或转录,调控基因表达。 RNA占染色体的1%~3%,含量最少,变化较大,可能通过与组蛋白、非组蛋白相互作用调控基因表达。 ⒉ 染色体的结构模型 ㈢DNA三级结构的生物学意义 1. DNA分子的长度在双螺旋基础上高度压缩,有利于包装。 2. 高级结构影响DNA双螺旋的解链,影响DNA与其他分子的作用,从而影响基因表达。 四、线粒体DNA的基本结构 线粒体DNA为双链闭环分子,不与蛋白质形成核蛋白结构,分散在线粒体基质的不同区域内。 五、端粒与端粒酶 端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端的一种特殊结构。 组成:端粒DNA和端粒结合蛋白(TBP)。 结构特点:d(TTAGGG)n构成的5~8kb长的一段特化区。 功能:保护线性DNA的完整复制、保护染色体体末端、决定细胞寿命。 端粒酶:促使端粒合成的酶。 组成:RNA和蛋白质,是特殊的核糖核蛋白酶复合体。 功能:以自身的RNA为模板合成端粒顺序并添加到染色体末端。 六、DNA的变性、复性与分子杂交 1.DNA变性:指DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。 变性的实质:氢键断裂 、碱基间的堆积力遭到破坏 。 变性因素:加热、极端的pH、有机溶剂、尿素及甲酰胺等 。 变性后的改变:溶液粘度降低。溶液旋光性发生改变,增色效应。 解链温度 (融解温度 )——Tm:核酸分子内50%的双螺旋结构被破坏的温度。 2.DNA复性:指变性DNA在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。 热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为退火。 3.分子杂交: 不同来源的核酸变性后,合并在一处进行复性,形成杂化双链的过程。 第二节 RNA的结构和功能 RNA与DNA不同之处是:核糖/脱氧核糖,尿嘧啶/胸腺嘧啶。 包含AMP、GMP、CMP、UMP四种核苷酸。 RNA是单链线性分子,通过自身折叠形成发夹结构(hairpin)和茎环结构(stem-loop)。 RNA碱基组成之间无一定的比例关系,且稀有碱基较多。 功能: 1、遗传信息传递体和储存体 2、具有酶的功能(
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