人p66Shc重组腺病毒抑制Hela细胞增殖的体外研究.pdfVIP

国际生物医学工程杂志2013年 8月第36卷第 4期 IntJBiomedEng，August2013，Vo1．36，No4 · l93 · · 论 著 · 人 p66Shc重组腺病毒抑制 Hela细胞增殖的 体外研究 徐蓉 胡刚 林雅军 杨晓姗 柳江 马桂蕾 魏洁 程建华 孙洪范 摘【要】 目的 探讨人p66Shc重组腺病毒抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的作用及机制。方法 Hela 细胞分为空白对照组(不感染腺病毒)、阴性对照组 (感染AdenoX—LacZ)和实验组 (感染 AdenoX—p66Shc)。 通过细胞生长曲线、MTT检测分析观察细胞的生长状态；DHE染色法检测细胞内活性氧生成；流式细胞仪 检测细胞周期；WesternBlot法检测细胞内相关蛋 白的表达。结果 p66Shc重组腺病毒能够抑制 Hela细 胞增殖，且随着p66Shc重组腺病毒处理时间延长和剂量增加其抑制作用增强。与空白和阴性对照组比较， p66Shc重组腺病毒感染48h后 ，G2／M期细胞比例明显升高，其差异具有统计学意义 (P0．O1)；同时引起 Hela细胞活性氧水平显著上升，p53、CyclinB1蛋白表达显著升高，其差异具有统计学意义 ( O．05)。结论 p66Shc重组腺病毒能够显著抑制Hela细胞增殖 ，并诱导其发生G2／M期阻滞。 关【键词】 p66Shc； 宫颈癌； Hela细胞； 增殖 中图分类号：R737．33：Q813 文献标识码：A 文章编号 ：1673—4181(2013)04—0193～05 Inhibitiveeffectofhumanp66Shcrecombinantadenoviruson proliferationofHelacells XURong*,HU Gang,LINY岫un，YANGXiao-shan,LIUJiang,MAGui—lei,WElJie，CHENGJian-huo,SUNHong-fan． Institute ofBiomedicalEngineering,ChineseAcademyofMedicalSciencesPekingUnionMedicalCollege；TianjinKey LaboratoryofBiomedicalMaterials，Tianjin300192，China A【bstract】 objective Toinvestigatetheinhibitiveeffectandmechanismofhumanp66Shcrecombinant adenovirusontheproliferationofhumancervicalcancerHelaceils．Methods Thecellsweredividedintothree groups：blankcontrolgroup(Helacells)，negativecontrolgroup(HelacellsinfectedwithAdenoX-LacZ)andexperiment group(HelaceilsinfectedwithAdenoX—p66Shc)．TheproliferationabilitywasinvestigatedbycellgrowthCurve， Mrrrdetection．Reactiveoxygenspecies(ROS)weredetectedbyFluorescentProbe—DHE(dihydroethidium)．rrhecell cycleswereanalyzedbyflowcytometry．Westernblotwereusedtoobserveassociatedproteinexpression．Results Thehumanp66ShcrecombinantadenoviruscouldefficientlysuppresstheproliferationofHelacells．Theinhibition effectsseem tobepositivedoseandtimeofactiondependent．Comparedwithblankandnegativecontrolgroup，the ratioofthecellphaseG2／MofHelacellsinfectedwithAdenoX—p66Shcfor48hs