原位杂交技术及其在水产养殖中的应用.pdfVIP

维普资讯 第 26卷 第 1期 海 洋 水 产 研 究 Vo1．26，NO．1 2005年 2月 MARINE FISHERIESRESEARCH Feb．，2005 · 综述 · 原位杂交技术及其在水产养殖中的应用 何玉英 李 健 刘 萍 王清印 (中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071) 摘 要 原位杂交技术是近年来快速发展起来的一门新技术。本文介绍了原位杂交技术的基本原 理和几种常用的原位杂交技术，并概述了原位杂交技术在水产养殖中的应用现状，包括该技术在基因 定位、性别鉴定和病毒检测等领域的应用。此外，还对该技术的应用前景进行了展望。 关键词 原位杂交 水产养殖 染色体 中图分类号 $94；Q81 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2005)O1—0074—06 Insituhybridizationtechniqueandtheapplicationsinaquaculture HEYu—ying LIJian LIU Ping WANG Qing—yin (Yellow SeaFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences，Qingdao266071) ABSTRACT Insitu hybridizationtechniqueisanew techniquerapidlydeveloping．Inthis paper，thebasicprinciplesandafew insituhybridizationtechniqueswerereviewd，andthecur— rentapplicationsofthistechniqueinaquacultureweredescribed，includinggenelocallization， sexidentification，andvirusdetectionandSOon．Opinionsonthedevelopmentoftheinsituhy— bridizationtechniqueinthefutureareputforward． KEY WORDS Insituhybridization Aquaculture Chromosome 原位杂交技术 (Insituhybridization，ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技 术，始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂 交，将该基因进行定位，与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利用同位素标记核酸探针进行 了细胞或组织的基因定位，从而创造了原位杂交技术。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是20 世纪70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功，为原位杂交技术的发展奠定了深厚 的技术基础。 1 原位杂交的基本原理 原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，将有放射性或非放射性的外源核 酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测 DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，经一定的检测 手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件：组 织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等 青岛市科技计划项 目(03—2一HH一6)资助 *通讯作者。E—mail：lijian@ysfri．ac．cn 收稿 日期 ：2003—09—22；接受 日期：2003—12—17 作者简介：何玉英 (1974)，女，研究实习员，主要从事海水健康养殖技术研究，E-mail：heyy@ysfri