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卫固窒墼壅鎏 坌塑垫 基于温度梯度模型的HPLC分析 在近年来所开发的一系列液相色谱方法中．温度梯度淋洗方法 有着独特 的应用．尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析 中。本 文介绍 了如何将 已存在保 留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的 HPLC方法。 文 ／SteffenWiese，ThorstenTeutenberg，TorstenC．$chmidt， Hans-JuergenRieger,ImreMorlar _任 高效液相色谱H(PLc)的方法 首先是需要一种高温柱温炉来控制流动 开发中，原则上都是采用反复试验法来 相和固定相的温度，这种装置应该在流 建立的，实验室用户根据 自己的经验来 动相进入分离柱之前加 以预热。另一前 改变一些参数以解决其色谱分离的问 提是 ，将流动相离开分离桂之后降低到 图 1．SIM 的HT_HPLC一200枉温炉可 使温度作为液相 色谱的活性参数。 题，但是这一过程耗费大量时 间和财 确定的温度。如此构想的加热系统 已通 力。HPLC梯度淋洗的原理已于 1980 过与德国能源与环境研究所 IUTA的合 年为 Synder所提出，为此方法的开发 作开发成功，现在通过 SIM 公司以HT- 的基于二氧化钛和二氧化锆这类金属氧 利用 了商业化的软件程序例如Drylab HPLC一200柱温炉的模型名称销售 (见 化物的分离柱之外，还有基于二氧化硅 程序系统。借助这种软件，可以将溶质 图 1)。这种模块化构建的系统由淋洗液 的合成材料可以应用，并在超过 100C 的保留行为对各种色谱参数的依赖关系 预热部分、柱加热部分和淋洗液冷却部 的高温下具有 良好的温度稳定性。其中 建立模型。通常是对梯度作用时间fG、 分组成，每一摸块均可单独控制和编程， Waters—BEH材料的温度和pH稳定性尤 温度 T，或者溶剂强度B的百分含量以 该加热系统的工作范围是 30～200~C。此 为出众。 及流动相的pH值同时进行优化。由能 外，柱温炉还能够 以30℃ ／min的速率 目前的问题是 ，在液相色谱中，为 源和环境研究所与应用色谱 Mornal研 加热或冷却，所以可于很短时间内冷却 什么必须应用温度梯度?本文开头 已指 究所共同合作的项 目，旨在将 Synder 到起始温度。 出，一系列的联合技术是基于应用纯水 提出的模型作进一步的发展。近年来， 另一前提 ，就是保证在高温 HPLC 作为流动相。为了使样品中所含的物质 温度参数在液相色谱中正显得越来越重 的例行加热时固定相的温度稳定性。当 都能够被淋洗出来，在色谱进行的过程 要 ，尤其是一系列要求用纯水作为流动 前仅有很少的商品分离柱具有这种足够 中淋洗液的强度必须予以提高。因为这 相的分析中。 的温度稳定性。除了多年来商业上提供 里没有其他溶剂梯度淋洗可用，惟一的 HPLC中的温度梯度 为了将温度作为高效液相色谱中的 采国纯水淋洗韵的反相色谱 参数加 以利用，必须满足不问的前提。 基于用纯水作淋洗剂的反相HPLC分离已由Morlar和 Horvath于 1976年所 描述。这一在 当时被称为 “纯水反相色谱 (NARP)”的分离技术，利用的是水 本文作者 ThorstenTeutenberg来 自 在不断增高的温度下越来越趋于非极性这样一种效应。由此可以对一些像类固 于德 国杜伊斯堡市能源与环境技术研究 醇这样具有很强的非极性的物质进行分离，而不用附加任何改进剂到反相