参慈胶囊联合顺铂对Lewis肺癌组织免疫抑制因子TGF-β_1及IL-10 mRNA的影响.pdfVIP

呻善材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第34卷第 12期2011年12月 参慈胶囊联合顺铂对 Lewis肺癌组织免疫抑制因子 TGF-13l及 IL一10mRNA的影响 徐立群 ，吴 迪 ，薛兴阳。，张荣华 ，王跃斌。，陈锐深。 (1．广州医学院附属肿瘤医院／广州医学院附属肿瘤医院肿瘤研究所，广东 广州510095；2．暨南大学药学 院，广东 广州510632；3．广州中医药大学第一附属医院，广东 广州510405) 摘要 目的：探讨参慈胶囊对小鼠Lewis肺癌组织中免疫抑制因子TGF-f1．、IL一10mRNA的影响。方法：将40 只C57BL／6小鼠自接种Lewis肺癌瘤株细胞建立实体瘤模型，随机分为参慈胶囊组、参慈胶囊+顺铂组、顺铂组、 模型组。模型组予等量生理盐水 ，其余各组荷瘤小鼠均用药21d，测量肿瘤质量并计算抑瘤率，采用FQPCR技术 检测Lewis肺癌荷瘤小鼠癌细胞表达TGF-fl、IL一10mRNA的情况。结果：抑瘤率方面参慈胶囊+顺铂组抑瘤率显 著高于其他3组(P0．01)，参慈胶囊+顺铂能显著降低Lewis肺癌组织TGF-fl、IL一10mRNA的表达 (P0．01)。 结论：(1)参慈胶囊配合顺铂能抑制 Lewis肺癌生长，二者联用具有协同效应；(2)下调TGF ，、IL一10mRNA的表 达，可能是其抑制肿瘤生长的机制之一。 关键词 参慈胶囊 ；顺铂；免疫抑制 中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号2011)12—1932-03 近年来研究发现，肿瘤细胞产生和分泌多种免 1．4 主要仪器 PE7000全 自动荧光定量PCR仪 疫抑制因子是导致荷瘤机体免疫逃逸的原因之一， (美 国PkinElmer公司)。 其中TGF-fl、IL一10两种细胞因子与非小细胞肺癌 2 方法 (NSCLC)的浸润、发展、转移有密切的关系。参慈 2．1 引物设计 引物序列根据 Genebank人类各 胶囊从中医名方仙鱼汤化裁而来，在临床应用多年， 目的基因cDNA序列，引物用 Primer5软件 自行设 疗效显著 ¨。本研究观察参慈胶囊对 C57BL／6小 计。引物序列如下：TGF-~．上游引物：5．AAACGG 鼠Lewis肺癌组织免疫抑制因子TGF-fl、IL．10mR— AAGCGCATCGAA一3，下游引物 ：5-GGGACTGGC NA的影响，探讨参慈胶囊对 lewis肺癌移植瘤的分 GAGCCTTAGTF．3，扩增产物为 63bp；IL．10上游 子免疫学机制。 引物：5．ACTGCTATGCTGCCTGCTCTr．3，下游 1 材料与仪器 引物 ：5．TGGGAAGTGGGTGCAGTYA1Tr．3，扩增 1．1 瘤株 Lewis肺癌细胞株：引自中国医学科学 产物为 88bp；一actin上游引物 ：5．CGTGTYCCT 院肿瘤分子研究所，广州中医药大学肿瘤研究所提 ACCCCCAATGT一3，下游 引物：5一TGTCATCAT 供。 ACTTGGCAGGTFTCT．3。上海生工生物工程公 1．2 实验动物 C57BL／6小鼠，雌雄各半，体质量 司合成。 18～22g，广州中医药大学动物实验中心提供。动 2．2 模型建立 将液氮冻存的小鼠Lewis肺癌细 物许可证号：SYXK(粤)2003-0001。 胞复苏后传代，取第3代细胞接种于C57BL／6小鼠 1．3 药物与试剂 参慈胶囊，由仙鹤草 15g、鱼腥 右侧腋下，培养8d后，选择精神状态 良好，瘤体饱 草3Og、猫爪草30g、山海螺30g、党参25g、田七 满的小鼠，于无菌条件下消毒鼠腹，取出瘤体，并匀 10g、山慈菇 10g、浙贝l5g、守宫5g、天冬 15g、炙 浆，无菌