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* * 实验二 减数分裂标本的制备与观察 一 实验目的 初步掌握减数分裂细胞的制片技术，观察动物精子形成中的减数分裂过程 二 实验原理 三 材料 1 ♀：24，xx，个体大 ♂：23，xo，个体小 2 8,9月水稻成熟时采集，用卡诺氏液固定24h，95%乙醇清洗后用70%酒精保存与4℃冰箱中。 精子的形成过程图解 精原细胞 初级精母细胞（第一次分裂） 次级精母细胞（第二次分裂） 精细胞 精子 四 实验步骤 1 取材：精巢——在第三节背板位置上，靠背板上的黄色或褐色的椭球形结构，外有薄膜包被，去掉薄膜，可见一条条精细管，取出放入水中，切成两段，留大段，用蒸馏水冲洗。 2 1N HCl，2min（白瓷盘中），然后用蒸馏水洗 3 改良苯酚品红染色（载片），约10min 4 制片 少量甘油蛋白均匀涂在载片上（吸附材料），自然凉干或烘干（1—3s) 放已染色的精细管于载片上，滴一两滴染液 盖盖玻片，用解剖针或铅笔头轻敲使细胞分散，压片，注意勿使盖片移动 稍微烤烤 5 观察 6 制永久片 作记号（蜡笔或金刚砂笔），目的在于分清盖片正反，以便把盖片原位复原 冰冻制片：-70 ℃，几分钟 揭盖片：用解剖刀迅速揭 脱水：95%乙醇1min（回收） 载玻片放大染缸，盖玻片放小染缸 再脱水：100%乙醇1min（回收）
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