超声介导微泡空化增加鼠肺内皮细胞基因转染及其.pdfVIP

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2010;30(11 南方医科大学学报(JSouthMedUniv 窑2505 窑 超声介导微泡空化增加鼠肺内皮细胞基因转染及其作用机制 1 2 1 1 1 2 周忠江 袁叶海燕 袁崔 凯 袁王玉筵 渊 南方医科大学南方医院心内 袁广东 广州 510515曰 广东省人民医院妇 产 袁广东 广州 510080冤 摘要院目的初步探讨超声介导声学微泡野空化效应冶对鼠肺微血管内皮细胞基因转染的影响及其作用机制遥 方法6孔 板培养鼠肺微血管内皮细胞袁加20 滋g报告基因质粒EGFP及 10%白蛋白微泡渊全氟显冤袁连续波超声照射进行微泡野空 化冶袁观察不同照射时间相同机械指数渊MI=1.0冤渊A 组院30s曰B 组院60s曰C组院90s曰D 组院120s曰E组院180s冤及不同MI相 同照射时间渊60s冤渊B 组院MI0.5曰B 组院MI0.75曰B 组院MI1.0曰B 组院MI1.5曰B 组院MI1.8冤报告基因转染情况遥以激光共 1 2 3 4 5 聚焦观察细胞膜膜流动性尧 免疫荧光观察细胞微管蛋白及微丝蛋白遥 结果反应细胞膜流动性的荧光恢复强度分别为 A组0.173依0.013尧B组0.250依0.037尧C组0.364依0.022尧D组0.381依0.019尧E组0.395依0.009 渊与A组相比袁P0.01冤曰B 组 1 0.171依0.017尧B 组0.255依0.026尧B 组0.378依0.007尧B 组0.382依0.009尧B 组0.397依0.008渊与B 组相比袁P0.01冤遥 反 2 3 4 5 1 应细胞微管蛋白变化的荧光强度分别为A 组 159.15依4.79尧B 组 188.23依6.20尧C组205.80依4.48尧D 组208.99依8.34尧E组 213.70依5.09渊与A组相比袁P0.01冤曰B 组 176.84依3.10尧B 组 187.57依14.52尧B 组206.41依11.66尧B 组220.12依13.39尧B 组 1 2 3 4 5 221.16依12.78渊与B 组相比袁P0.01冤曰各组微丝蛋白结构完整袁无断裂及紊乱袁荧光强度差别无统计学差异遥 结论超声 1 介导微泡空化能增加基因转染率袁对细胞骨架无明显损伤曰当MI为 1.0时袁随照时延长细胞膜流动性及细胞骨架微管 蛋白荧光强度增强曰当照射时间为60s袁随MI增高细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光增强袁但两种条件下均存在 一定阈值曰微丝蛋白荧光强度不随超声照射模式而改变遥 关键词院超声照射曰微泡空化曰基因转染曰细胞骨架曰细胞膜流动性 中图分类号院R329;Q78 文献标志码院A 文章编号院1673-4254(2010)11-2505-04 Ultrasound-mediated microbubble cavitation enhances gene transduction in rat pulmonary endothelialcellspartially

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