王镜岩生物化学经典课件17蛋白质合成和基因工程考.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * EF-Tu和EF-G的结构：EF-Tu的三个结构域分别用红，绿和淡蓝色表示，淡紫色表示。 tRNAEF-G-tRNA的结构与EF-Tu-tRNA相似，二者竞争核糖体上的同一个结合部位。 2个tRNA(L形管状)在延伸反应中的位置：tRNA的反密码环指向小亚基的裂缝(mRNA从此处穿过)，氨基酸臂相互靠近，在蛋白质合成过程中，tRNA既可绕氨基酸臂旋转，也可绕反密码臂旋转。黄色区域是氨酰-tRNA和延伸因子进入的位置。 (八) 翻译的终止需要释放因子和终止密码子的参加 RF1识别UAA和UAG，RF2识别UAA和UGA，RF3协助二者起作用。 核糖体循环 原核生物的转录翻译同步进行 多聚核糖体的电镜照片 色氨酸操纵子可以表达多种蛋白质 三. 真核生物肽链的合成 真核生物mRNA的结构 （一）真核生物肽链合成的特点 真核生物肽链合成的起始分为3个阶段。 eIF4G 是结合eIF4E:帽子复合物的多功能接头 polyA结合蛋白 eIF-2活性的调节 在真核生物中，促进氨酰-tRNA进位的延伸因子只有一种EFT1，促进移位的为EFT2，真核生物的肽链合成终止只需要一种终止因子RF。 不可用 （二）肽链合成的抑制剂 四环素族（金霉素、新霉素、土霉素）：作用于30S和40S亚基，阻碍tRNA与小亚基结合，易进入细菌，不易进入哺乳类细胞； 链霉素、新霉素、卡那霉素：作用于30S亚基，抑制启动，造成误译； 氯霉素、林可霉素、红霉素：作用于50S亚基，抑制转肽酶，妨碍移位； 白喉毒素:修饰EFT2的氨基酸，强烈抑制真核生物蛋白质的合成； 蓖麻蛋白:的B链与细胞结合，使A链进入细胞，作用于60S亚基，抑制EFT2的作用，天花粉蛋白、肥皂毒素、苦瓜素的结构与EFT2的A链相似，作用机制与蓖麻蛋白类似； 嘌呤霉素:可以阻断氨酰-tRNA的进位； 放线菌酮:抑制真核生物蛋白质的合成； 天门冬酰胺酶:分解天门冬酰胺，抑制蛋白质合成，可用于治疗白血病； 干扰素:可以活化一种蛋白激酶，使eIF2磷酸化，抑制蛋白质合成，还可以活化核酸内切酶，分解病毒的mRNA, 因而有抗病毒作用，同时，可以活化T细胞，有一定的抗肿瘤作用。 氯霉素 环己亚胺或放线菌酮 红霉素 梭链孢素 四环素 链霉素 嘌呤霉素 酪氨酰-tRAN 硫链丝菌肽 白喉毒素对肽链合成的抑制 白喉酰胺 白喉毒素 四、蛋白质的运输及翻译后修饰 (一) 蛋白质通过其信号肽引导到目的地 (二) 一些线粒体叶绿体蛋白质是翻译完成后被运输的 由核基因编码的线粒体外膜蛋白质的N端有线粒体定向肽，起信号肽的作用，可以与外膜上的相应位点相识别，定向肽富含带正电荷的氨基酸及丝氨酸和苏氨酸，氨基酸序列为：MLKTSSLFTRRUQPSLFRNILRLQST- 。 细胞色素c1前体蛋白的N端有两个信号肽序列，第一个信号肽序列识别线粒体外膜上的受体蛋白，引导肽链进入线粒体基质，随后被切除。第二个信号肽序列用相似的方式引导肽链穿过内膜，折叠成天然构象，并与血红素分子结合。 核基因编码的叶绿体蛋白N端有叶绿体转移肽，肽链转移的方式与线粒体相似。 (三) 分泌型的真核蛋白在内质网(endoplasmic reticulum，ER)内合成 易位子 (四) 高尔基体中多肽的糖基化修饰及多肽的分类 在高尔基体中，对糖蛋白的寡糖链进行修饰和调整，将各种多肽分类送往溶酶体、分泌粒和质膜等目的地。 (五) 大肠杆菌蛋白质在翻译的同时也在被运输 细菌的非细胞质蛋白在核糖体上合成的同时被运送到质膜或跨过质膜，称作翻译中运输。新生肽链N端有引导序列，可以识别膜蛋白，将正在翻译的核糖体引导至质膜，使合成的多肽链定位于质膜，或分泌出细胞，引导序列可以被引导肽酶切除。 (六) 肽链折叠的途径 (a)分子伴侣非依赖性折叠，折叠在肽链合成过程中，或肽链被截短后进行； (b)依赖于Hsp70的折叠； (c)依赖于Hsp70和分子伴侣复合体的折叠，原核生物的分子伴侣复合体为GroES-GroEL，真核生物的分子伴侣复合体为TR1C(TCP1 ring complex)，或CCT(cytosolic chaperonin containing TCP1)。 GroEL-GroES复合物的结构和功能 GroES GroEL顶部 GroEL基部 顶面观 侧面观 剖面观 泛酰蛋白质的合成 （七）蛋白质的降解 酸性N-末端蛋白质的修饰在蛋白质降解系统中的作用 被蛋白质降解系统识别 泛酰蛋白质降解的途径 真核生物基因表达调控的总结 （1）DNA水平的