水稻金属硫蛋白ricMT的耐性分析.docVIP

  1. 1、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
 水稻金属硫蛋白 ricMT 的耐性分析# 张红晓* (河南科技大学农学院) 5 10 15 20 25 30 35 摘要:铜镉胁迫下水稻幼根中金属硫蛋白基因 ricMT 被显著诱导,通过构建 ricMT 基因的 原核表达载体及大肠杆菌转化,进行 ricMT 基因的耐性分析,结果显示,经 IPTG 诱导后, 转入 ricMT 的菌株比转入空载体的对照菌在铜、镉和 H2O2 胁迫下生长旺盛,这说明 ricMT 的表达有利于增加大肠杆菌对重金属胁迫的耐性。 关键词:ricMT; 耐性; 铜; 镉 中图分类号:Q945.78 Tolerance Analysis of Metallothionein gene ricMT in Rice Zhang Hongxiao (College of Agriculture, Henan University of Science and Technology) Abstract: The metallothionein gene ricMT in rice young roots was induced significantly under copper (Cu) or cadmium (Cd).The prokaryotic expression vector of ricMT was constructed and transformed into E coli. for tolerance analysis. After induced with IPTG, the growth of recombinants was more prosperous than that of controls under Cu, Cd or H2O2 stresses. The results suggested ricMT expression can improve E coli. tolerant to various heavy metal stresses. Key words: ricMT; Tolerance; Cu; Cd 0 引言 随着工业化程度的日益推进,重金属污染已经成为当前社会的主要环境问题之一。植物 对重金属的耐性机理之一是合成金属络合物,如植物螯合肽(PCs)、金属硫蛋白(MTs) 等,与金属离子螯合,从而降低细胞质中重金属的自由离子活度。对动物 MTs 的研究发现, MTs 除了在保持细胞内金属离子的稳态方面起作用外,还参与许多生理过程,如清除活性 氧(ROS)、调节细胞生长和增殖、影响金属酶和转录因子的活性等。由于 MTs 含量低、 分子量小、富含半胱氨酸易于氧化等特点,目前对植物 MT 的研究还大多停留在转录水平, MT 的功能还没有被完全验证[1,2,3]。有研究报道 MT 在植物的耐铜毒害机制中起重要作用, MT 的过量表达显著提高植物对铜的积累和耐性[4,5]。我们前期通过双向电泳在水稻萌发种胚 中成功鉴定了一种水稻 MT,即 ricMT,在铜胁迫下表达显著升高[6]。本研究通过对铜镉胁 迫对水稻幼根 ricMT 基因的诱导及 ricMT 原核表达转化子的耐性分析,来初步验证 ricMT 基因的功能,并为随后 ricMT 转基因水稻的培育打下基础。 1 材料与方法 1.1  材料 供试水稻为粳稻品种武运粳 7 号(Oryza sativa L. ssp. Japonica cv. Wuyunjing 7),大肠 杆菌(Escherichia coli.)菌株为本实验室保存的 DH5α ,克隆载体 pCR2.1(3.9kb) 购自 Invitrogen 公司,用于 PCR 产物回收克隆;pET-30a(+) 载体购自 Novagen 公司,用于原核 基金项目:高校博士点基金(新教师类,20090097120040)和河南科技大学博士启动基金 作者简介:张红晓(1974-),女,讲师,逆境生理生化. E-mail: zhanghx21@126.com -1-  40  表达。 总 RNA 提取试剂盒购自南京基天生物技术公司;反转录试剂盒购自美国 Promega 公司, 限制性内切酶、T4-DNA 连接酶和 DNA Marker 均为 TaKaRa 公司产品。DNA 胶回收纯化试 剂盒购自上海华舜公司,IPTG、X-gal、卡那霉素(Kanamycin,Kan)购自南京生兴生物技 术公司。 45  1.2 1.2.1  实验方法 铜镉胁迫下 ricMT 的 RT-PCR 分析 100 μmol/L CuSO4 和 100 μmol/LCdCl2 处理萌发 3 天的武运粳水稻种胚 12、24 和 48h,

文档评论(0)

baihuamei + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档