2010年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定用HPLC法的建立.pdfVIP

2010 年版中国药典品种盐酸多西环素及其制剂 含量和有关物质测定用HPLC 法的建立 1* 1 1 2 1 袁耀佐 ；张玫 ；钱文 ；杨志明 ；赵恂 （1 江苏省食品药品检验所，南京 210008 ；2 常州制药厂有限公司，常州 213018 ） 摘要 目的：建立先进的盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定方法，用于2010 年版中国药典。方法：用十八烷 基硅烷键合硅胶为填充剂（pH 值适用范围应大于9 ）；以醋酸盐缓冲液[0.25mol/L 醋酸铵－0.1mol/L 乙二胺四醋酸二 钠－三乙胺（100：10：1），用冰醋酸或氨水调节pH 值至8.8]－乙腈（85：15）为流动相；柱温35℃；检测波长为 280nm，流速：1.0ml/min；进样体积：20μl 。结果：新色谱条件中用醋酸铵代替草酸铵，解决了《中国药典》2005 年 版流动相中容易结晶析出堵塞系统管路的问题；通过调整流动相pH 值提高了柱效，通过添加EDTA 钠和三乙胺改善 色谱峰的对称性，使部分原来色谱条件无法有效分离杂质 C 和杂质 F 在新系统中能与相邻峰完全分离。代表性样品 色谱图中检出6 个主要杂质峰，用杂质对照品对杂质A(β-多西环素) 、B(美他环素) 、E(土霉素)进行了定位；用文献方 法制备含已知杂质的溶液对杂质C(4-表多西环素) 、D(4-表-6-表多西环素)进行了定位；用制备薄层色谱制得杂质F(2- 乙酰-2-脱碳酰胺多西环素)溶液(纯度大于 99%)，用 LC-ESI-IP-MS2 对主成分的结构进行了鉴定，用该溶液对杂质 F 进行了定位，土霉素、美他环素、β-多西环素相对于多西环素的相对响应因子（relative response factor ，RRF ）分别为 0.95、1.29、0.77 。建立的方法在 0.07～122.556μg/ml 范围内线性良好（r=1.0 ），检测限和定量限分别约为 0.016、 0.063μg/ml ，多西环素及已知杂质的检测精密度良好，片剂和胶囊的回收率分别为 99.2%(n=9)、99.4%(n=9) （RSD% 均为0.2% ），主成分在0.01mol/L 的溶剂中可以稳定24 小时。微调该色谱条件，可用于土霉素、四环素、金霉素、 米诺环素和美他环素的含量和有关物质的测定。结论：建立的方法优于CP2005、USP31/NF26 、BP2008 、Ph.Eur 6.0、 JP ⅩⅤ中同品种方法，被2010 年版中国药典采用。 关键词 盐酸多西环素；高效液相色谱法；含量测定；有关物质；中国药典2010 版 The Establishment of Chromatographic Analysis Method of Doxycycline Hyclate and Its Preparations for Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 2010 1 1 1 2 1 Yuan Yao-zuo , Zhang Mei ，Qian Wen ，Yang Zhi-ming and Zhao Xun (1.Jiangsu Institute for drug control, Nanjing 210008; 2.Changzhou Pharmaceutical factory Changzhou 213018) Abstract Objectives To establish a better chromatographic analysis method of doxycycline hyclate and its preparations for Pharmacopoeia of the People’s Repu