高效液相色谱仪常用检测器的维护与使用.PDF

二○○九年·第一期 使用与维修 高效液相色谱仪常用检测器的使用与维护 龚时琼 (华中科技大学化学与化工学院 武汉 430074) 摘  要  高效液相色谱是高等院校、药业、食品、环保等各个领域常用的仪器之一。笔 者对常用检测器的故障进行分析、同时对示差折光检测器的原理及使用等进行介绍，旨 在给从事液相色谱仪使用的人员提供一点参考。 关键词  高效液相色谱仪 检测器 使用 维护 高效液相色谱 (High Performance Liquid Chro- 检测器性能的好坏直接影响仪器的正常工作， matography. HPLC) 是现代分离测定的重要手段 [1] 。从 其中噪声和漂移是检测器稳定性的主要表现。 20 世纪 60 年代后期发展以来，因其具有高效、快速、 2.1 基线噪声较大的可能原因及对策 高灵敏度、能分析高沸点的热不稳定性物质的特点 噪声是指由检测器输出与被测样品组分无关的 而被广泛应用于生化、药物及临床分析。高效液相 无规则波动信号。对于判断基线噪声是来 自检测器 色谱是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或 还是来 自泵或流动相，可将泵关上 , 继续走基线， 不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固 如果噪声立即停止，基线呈一条直线 , 说明基线噪 定相的色谱柱，当携带着混合样品的流动相流经色 声来 自泵或流动相中的气泡 , 应设法排气 ；若停泵 谱柱时，被测物质在两相之间进行反复多次分配， 后仍有噪音出现 , 应检查检测器。如果上述都检查 由于各组分分配系数的差异，它们以不同的速度通 过，那需要考虑的其它问题就是 ：是否改变流动相 过色谱柱，最后得以分离，在柱内各成分被分离后 的组成 ；是否改变检测波长 ；流动相是否相溶 ；流 [2] 依次进入检测器，色谱信号由色谱工作站记录 。 动相是否干净等问题，然后针对问题一一排除。 2.2 基线漂移 1  检测器的作用与类型 一般说来 , 机器刚启动时 , 基线容易漂移 , 对 1.1 检测器的作用 紫外检测器来说，大概需要 0.5h 的平衡时间 , 如果 高效液相色谱仪是由溶剂贮液器、泵、进样器、 在实验过程中发现基线漂移 , 则可考虑以表 1 所列 色谱分离柱、检测器和数据处理系统几部分组成。 基线漂移的可能原因及解决方法。 检测器、泵与色谱柱是组成高效液相色谱仪的三大 表1 基线漂移的可能原因及解决方法[3] 关键部件，其中检测器是高效液相色谱仪的眼睛， 原因 解决方法 它将样品的物理或化学特性信息转换成易测量的电 温度波动 （尤其是 控制好柱子和流动相的温度 , 检查是 示差折光检测器） 否有打开的窗户或空调对着柱温箱 信号输入到记录仪，并记录下来，得到样品组分分 流通池被污染或有 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通 离的色谱图。 气体 池 ( 不接柱子，直接接检测器 ) 1.2 检测器的类型 紫外灯能量