微生物的代谢与发酵.PPTVIP

(2)诱导物（inducer）与辅阻遏物（corepressor）——诱导物——是起始酶诱导合成的物质，如乳糖等；（与调节蛋白结合，抑制其与操纵基因的结合促进转录进行）；辅阻遏物——是阻遏酶产生的物质，如氨基酸和核苷酸等；（调节蛋白结合，促进其与操纵基因的结合抑制转录进行）；它们都是小分子信号物质，常被总称为效应物（effecor），可与调节蛋白相结合以使后者发生变构作用，并进一步提高或降低与操纵基因的结合能力。(3)阻遏物（repressor）与和阻遏物蛋白（aporepresseor）——二者都是由调节基因编码产生特异性调节蛋白(regulatorypotein)，；它俩是一类低分子量变构蛋白，有两个结合位点，一个与操纵基因结合，另一位点可与效应物结合；当调节蛋白与效应物结合后，就发生变构作用，变构后与操纵基因的结合能力可提高或下降。（有活性——可与O结合；无活性——不与O结合）阻遏物:能在没有诱导物时与操纵基因结合的调节蛋白；阻遏物蛋白:只能再有辅阻遏物存在时才能与操纵基因结合。对数生长期的大肠杆菌（E.coli）培养基中加入乳糖诱导?-半乳糖苷酶的合成正调节：转录过程依赖于调节蛋白的存在。负调节：转录过程不依赖于调节蛋白的存在。E.coli乳糖操纵子学说(负调节）六生物热的利用第三节微生物的代谢产物一分解代谢产物的生化反应微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物.因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一.1糖发酵实验不同的细菌具有不同的糖酶以分解相应糖类，而且分解各种糖类后的终末产物也不一致，有的产酸，有的还产生气体，籍此可以作为鉴别细菌的一种依据，对肠道细菌鉴定尤为常用。结果：在未接种细菌前，培养管应澄清、紫色、小倒立管内无气泡。接种细菌后观察结果时，应先确定细菌是否生长，生长时则培养基变混浊。若能发酵培养基中所含的糖而产酸，则该培养基变黄色，记录结果以“+”号表示之。如该菌发酵糖时产酸兼产气，则培养基除变黄色外，其中倒立之小玻璃管有气泡，此时以“⊕”号记录之。如不发酵时，培养基不变色，则用“-”号记录之。糖发酵试验2V—P（Voges-Proslauer）试验某些细菌能分解葡萄糖，产生丙酮酸，再将丙酮酸脱羧变为中性的乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在碱性环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨水中的精氨酸所含的胍基起反应，生成红色的化合物，即为V—P试验阳性。方法：将大肠杆菌、产气杆菌分别接种于2支葡萄糖蛋白胨水。37℃孵育48小时后，分别加入等量李氏（Leifson）试剂，摇匀后不加塞，静置30分钟观察结果，出现红色者为阳性反应。VP试验阴性阳性大肠杆菌：—产气杆菌：+3甲基红试验许多细菌如大肠杆菌等，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸再被分解，产生甲酸、乙酸、乳酸等。这样使培养基的pH降至4.5以下，这时加入甲基红试剂便呈红色。分别接种大肠杆菌及产气杆菌于两支葡萄糖蛋白胨水中，置37℃孵育18—24小时，滴加甲基红试剂数滴，立即观察结果。甲基红为指示剂，变色范围为pH4.4（红色）—6.2（黄色）。若细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其它物质（如醇、醛、酮、气体和水等），则培养基的酸碱度仍在pH6.2以上，故加入甲基红指示剂呈黄色。红色为阳性反应，黄色为阴性反应。甲基红试验阳性阴性对照大肠杆菌：+产气杆菌：—4柠檬酸盐利用试验在柠檬酸盐培养基中，柠檬酸钠为碳的唯一来源，磷酸二氢铵为氨的唯一来源。有的细菌如产气杆菌等，可利用柠檬酸盐作为碳源，能在此培养基上生长，并分解枸椽酸盐而最后产生碳酸，使培养基变碱性，这样培养基中的澳麝香草酚蓝指标由绿色变深蓝色，即为柠檬酸盐利用试验阳性。若细菌不能利用枸椽酸盐为碳源，在此培养基上就不生长，培养基则不变色，则为柠檬酸盐利用试验阴性。方法：分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支柠檬酸盐培养基；37℃孵育24-48小时，观察结果，若有菌苔出现，培养基变为深蓝色则为阳性。柠檬酸利用试验大肠杆菌：—产气杆菌：+5靛基质（吲哚）产生试验有些细菌能分解培养基中蛋白胨内的色氨酸形成靛基质（又称吲哚），靛基质为无色，不能直接观察，当加靛基质试剂（欧氏柯氏试剂）时，试剂中的对二甲基氨基苯甲醛与靛基质结合而成红色的玫瑰靛基质，则可为肉眼识别。方法：取大肠杆菌蛋白胨水培养物及伤寒杆菌蛋白胨水培养物各一管，沿管壁徐徐加入靛基质试剂（约0.3ml），如在试剂与培养物接触面之间有玫瑰红色出现者为阳性。