食用菌的概念.PPTVIP

一级菌种制作技术—一级菌种培养基的灭菌（三）一级菌种培养基的灭菌1．灭菌设备：手提式高压灭菌锅2．具体灭菌要求：1.1kg/cm2，121℃，保持20~30min。3．操作过程加水?装锅?盖盖?加热?当压力升为0.5kg/cm2时排放冷空气?正式升压?保压（1.1kg/cm2，121℃，保持20-30min）?停止加热?自然降压至零?排放余汽?开盖?取出灭菌物品?趁热摆斜面?检验灭菌效果（32℃空白培养48h）。一级菌种制作技术—菌种分离（一）菌种分离的概念菌种分离：用无菌操作的方法将所需要的食用菌从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。通过菌种分离得到的纯菌丝体即为一级菌种。?（二）菌种分离的关键严格按无菌操作规程进行无菌操作：任何一个操作过程都要注意避免把其它任何无关的菌体带入到培养基中。注意二点：1．严格树立无菌观念；2．严格遵循无菌操作规程。一级菌种制作技术—菌种分离（三）菌种分离的设备1．接种箱：操作规程2．净化工作台：操作规程3．接种室：操作规程（四）菌种分离的方法食用菌的分离方法很多，常用的有组织分离法、孢子分离法和基内菌丝分离法三种。一级菌种制作技术—菌种分离（四）菌种分离的方法1．组织分离法（1）概念将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法。（2）特点：①属于无性繁殖，能保持原有菌株的优良种性，是获得纯菌种的常用方法，且简单易行。②适用于大型肉质子实体，适用于孢子不易萌发的菌类。③若种菇感染病毒，不易脱毒。（3）操作过程（以伞菌类为例）种菇选择—种菇消毒—切取组织块—移接组织块至斜面中央—培养（25℃左右）一级菌种制作技术—菌种分离（四）菌种分离的方法2．孢子分离法（1）概念利用子实体产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法。（2）特点①属于有性繁殖，后代易发生变异，可用此法培育新品种。②分离过程较复杂，适用于胶质菌类和小型伞菌。（3）操作过程孢子的采集孢子的分离孢子的萌发一级菌种制作技术—菌种分离（四）菌种分离的方法3．基内菌丝分离法(基质分离法)概念：从生长子实体的培养基中分离菌丝获得纯培养的方法。特点：易感染杂菌。基内菌丝分离法一般只在下列情况下采用：①子实体已腐烂，但又必须保留该种菌种。②有些子实体小而薄，用组织分离法和孢子分离法较困难。③还有一些菌类如银耳菌丝，只有与香灰菌丝生长在一起才能产生子实体，如果要同时得到这两种菌丝的混合种，也只能采用基内菌丝分离法进行分离。一级菌种制作技术—菌种的纯化一级菌种的纯化：是指对分离获得的菌种进行再提纯，成为生产所需要的菌种的方法。1．菌丝的再提纯再提纯时，可选用菌落生长速度较为一致的菌丝体作为再提纯对象，用消毒的接种铲切取菌丝的前端部分（连同培养基一起），转移到新的培养基上培养。如果菌丝生长稀疏，也可采用单根菌丝分离法。经过几次的切割移植，逐渐挑选生长良好的无杂菌菌株，从而获得纯菌种。一级菌种制作技术—菌种的纯化2．污染物的排除在菌种分离后，细菌、霉菌的污染时有发生，必须加以排除。一般来讲，被杂菌污染的菌株不再使用。但有时由于菌种紧缺，并且污染物不多，也可用灭菌滤纸浸在1％的多菌灵溶液中，然后取出覆盖于霉菌的生长点上，以防止分生孢子的扩散，然后用接种铲切取一小块远离杂菌的健壮菌丝移至新的斜面培养基上培养。如果是细菌污染，细菌的菌落比较局限，并不会出现细胞飞扬现象，因此，可以先用接种铲将细菌菌落连同培养基一起取出来，再从无菌部位取菌丝块转管一次，同样可以获得纯菌种。一级菌种制作技术—出菇鉴定（试验）概念：是菌种投入生产前必须做的结实性鉴定试验。目的：进一步确定菌种，以避免菌种选育不当而造成不可估量的损失。内容：包括生产性状、商品性状、遗传性状三个方面。一级菌种制作技术—扩大培养（转管）一级菌种的扩大培养是在试管间进行的，因此又叫转管。转管原因：从外地购进或分离获得的母种数量有限，不能满足生产的需要时，要对初次获得的母种进行扩大繁殖，以增加母种数量。转管数量：一支母种可接15～20支试管斜面，扩大的数量根据实际情况而定。注意事项：母种的扩大繁殖不可无限制地移代，移代过多菌种生活力减弱，从而影响大面