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2025年临床分子生物学检验模拟题及答案

2025年临床分子生物学检验模拟试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.关于磁珠法提取基因组DNA的原理，以下描述正确的是：

A.利用磁珠表面羧基与蛋白质的特异性结合，通过磁场分离杂质

B.高盐低pH环境下，磁珠表面硅羟基与DNA磷酸基团通过氢键结合

C.加入RNase后，磁珠选择性吸附RNA，从而分离DNA

D.洗脱时通过降低盐浓度破坏DNA与磁珠的静电作用，释放DNA

答案：B

解析：磁珠法提取DNA的核心是利用磁珠表面的硅羟基（-SiOH）在高盐低pH条件下（如异硫氰酸胍/盐酸胍）与DNA磷酸骨架的氧原子形成氢键，从而吸附DNA；低盐高pH（如TE缓冲液）时氢键断裂，DNA被洗脱。选项A错误，羧基主要用于抗原抗体偶联；选项C错误，RNase用于降解RNA，不涉及磁珠选择性吸附；选项D错误，洗脱是通过破坏氢键而非静电作用。

2.实时荧光定量PCR（qPCR）中，若Ct值为18，模板初始拷贝数约为：

A.21?拷贝

B.22?拷贝

C.2?1?拷贝

D.无法直接确定

答案：D

解析：Ct值（循环阈值）与模板初始拷贝数的对数呈线性关系（Ct=-k·logN?+b），但具体拷贝数需通过标准曲线（已知浓度的标准品绘制）计算，无法仅通过Ct值直接确定。

3.以下哪种突变类型无法通过Sanger测序直接检测？

A.单核苷酸变异（SNV）

B.插入缺失（Indel，50bp）

C.基因重排（如BCR-ABL融合）

D.三核苷酸重复扩增（如FMR1基因CGG重复200次）

答案：D

解析：Sanger测序基于链终止法，读长约500-1000bp，可检测SNV、小片段Indel及融合基因（通过设计跨断裂点引物）。但三核苷酸重复扩增（如脆性X综合征的CGG重复）会导致测序峰图模糊（“stutter”），需结合Southernblot或毛细管电泳片段分析确认。

4.检测血液肿瘤微小残留病灶（MRD）时，首选的分子生物学技术是：

A.荧光原位杂交（FISH）

B.数字PCR（dPCR）

C.一代测序（Sanger）

D.染色体核型分析

答案：B

解析：MRD检测需高灵敏度（通常要求检测限10??），dPCR通过微滴分割实现单分子扩增，灵敏度可达0.001%（1/10?），优于qPCR（10?3）、FISH（10?2）及核型分析（10?1）。

5.以下关于CRISPR-Cas9技术在分子诊断中的应用，错误的是：

A.可用于精准切割特定DNA序列，辅助基因分型

B.与荧光报告系统结合，实现病原体快速检测（如CRISPR-Dx）

C.可直接修复患者体细胞中的致病突变（治疗用途）

D.通过检测Cas9切割后的片段长度变化，判断目标序列是否存在

答案：C

解析：CRISPR-Cas9在诊断中的应用包括基因编辑辅助分型（A）、快速检测（B）及片段分析（D），但直接修复致病突变属于治疗范畴（如体内基因治疗），不属于诊断技术。

6.某患者检测HBVDNA时，qPCR结果显示“无Ct值”，可能的原因不包括：

A.样本中HBVDNA浓度低于检测下限

B.引物/探针与病毒变异株不匹配（如S区突变）

C.提取过程中DNA被核酸酶降解

D.扩增程序设置为95℃预变性5分钟

答案：D

解析：95℃预变性5分钟是常规qPCR步骤（用于激活热启动酶、破坏病毒结构），不会导致无Ct值。其他选项均可能导致模板缺失或扩增失败。

7.检测BRCA1/BRCA2基因致病性突变时，最常用的技术组合是：

A.多重连接依赖探针扩增（MLPA）+全外显子测序（WES）

B.荧光定量PCR+限制性片段长度多态性（RFLP）

C.原位杂交（ISH）+基因芯片

D.质谱（MALDI-TOF）+Southernblot

答案：A

解析：BRCA1/BRCA2突变包括点突变（SNV）和大片段缺失/重复（CNV），WES可检测SNV，MLPA可检测CNV，二者联合覆盖95%以上突变类型。

8.以下哪种病毒的检测需同时检测RNA和DNA？

A.人类免疫缺陷病毒（HIV）

B.乙型肝炎病毒（HBV）

C.丙型肝炎病毒（HCV）

D.单纯疱疹病毒（HSV）

答案：B

解析：HBV为嗜肝DNA病毒，感染肝细胞后形成共价闭合环状DNA（cccDNA）作为复制模板，血清中可检测到病毒DNA（HBVDNA），而肝组织需检测cccDNA以评