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;;1.课程标准
概念5基因工程赋予生物新的遗传特性
5.1基因工程是一种重组DNA技术
5.1.1概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的
5.1.2阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具
5.1.3阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤
5.1.4举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质
5.2蛋白质工程是基因工程的延伸
5.2.1概述人们根据基因工程原理,进行蛋白质设计和改造,可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质
5.2.2举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;1.为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸汽灭菌处理。
2.该实验所需材料可以直接从公司购买,缓冲液和酶应分装成小份,并在-20℃储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融化。
3.在向微量离心管中添加反应组分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换。
4.在进行操作时,一定要戴好一次性手套
5.PCR扩增不能随意加大试剂用量
6.若电泳缓冲液使DNA带负电荷,加样孔侧应连电极的负极
;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;1.哪一侧是正极?
2.长短片段的分布有什么特点?;;;倒入0.1%亚甲基蓝溶液,没过凝胶约5mm,染色8min。凝胶下表面与培养皿之间,不要留有气泡。;不同的染色方法可以从照片中判断出来;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;2.考点梳理高频命题点04PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定;(二)琼脂糖凝胶电泳;;1.如果未出现条带,可能原因是什么?
2.如果出现不止一条条带,可能原因是什么?;【例】PCR技术可用于临床上病原菌的检测。为检测病人是否感染了某种病原菌,医生进行了相关操作:①利用PCR扩增DNA片段;②从病人组织样本中提取DNA;③分析PCR扩增结果;④采集病人组织样本。下列有关叙述正确的是(????)
A.若要得到正确的检测结果,操作顺序应该为②①③④
B.PCR扩增的原理是DNA半保留复制,所用缓冲液中常加入Mg2+
C.利用PCR扩增病原菌DNA时,需要设计两种碱基互补配对的引物
D.设计的引物中G、C碱基所占比例越高,复性所需的温度越低;【例】带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。下列关于电泳的叙述,正确的是(????)
A.电泳中带电粒子迁移速率只与所带电荷有关
B.电泳的过程要在一定的pH下进行,所以要使用缓冲液
C.DNA片段根据长度大小在凝胶上分开,形成连续的条带
D.切断电源后即可用肉眼观察到DNA条带在凝胶上的位置;【例】人血清白蛋白(HSA)是血浆蛋白的主要成分,具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转HSA基因的大肠杆菌,通过发酵工程,实现HSA的大量生产。下图表示HSA基因,有关叙述正确的是(????);阅读下列材料,完成下面小题。
科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列,将猪流行性腹泻病毒的S基因插入,以构建pET-SEA-S重组质粒,并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。
【例】目的基因导入受体细胞后,可用PCR技术筛选出成功导入pET-SEA-S融合表达质粒的细菌。下列各项所列引物用来进行筛选最合适的是();阅读下列材料,完成下面小题。
科研人员通过切割pET-SEA质粒上SEA基因和终止子之间的部分序列,将猪流行性腹泻病毒的S基因插入,以构建pET-SEA-S重组质粒,并在大肠杆菌中高效表达SEA-S融合蛋白。
【例】选择HPaⅠ酶和BamHⅠ酶对pET-SEA-S进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,电泳结果如图甲所示。若蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.12kDa,将表达的SEA-S融合蛋白进行凝胶电泳,图乙中显示的条带应是();【例】N一乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)在骨
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