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细胞培养技术员职业发展面试题

一、单选题（每题2分，共10题）

1.在细胞培养过程中，哪种培养基最常用于常规的细胞传代？（A）DMEM（B）RPMI-1640（C）F12（D）M199

答案：B

解析：RPMI-1640是应用最广泛的细胞培养基之一，尤其适用于悬浮培养和贴壁细胞培养。DMEM常用于神经细胞等特殊细胞系，F12主要用于肾脏细胞培养，M199主要用于造血细胞培养。

2.细胞冻存时，常用的保护剂是？（A）葡萄糖（B）甘露醇（C）蔗糖（D）乳糖

答案：B

解析：甘露醇是细胞冻存最常用的保护剂，能有效降低细胞内冰晶形成，保护细胞膜结构。葡萄糖和蔗糖渗透压过高，乳糖在冻存中效果较差。

3.细胞培养中，哪种现象属于细胞污染？（A）细胞密度过高（B）培养基颜色变红（C）出现菌落（D）细胞形态变圆

答案：C

解析：细胞污染包括细菌、酵母和支原体污染，出现菌落是典型污染迹象。细胞密度过高导致接触抑制，培养基变红可能因pH变化或酚红降解，细胞变圆是接触抑制或应激反应。

4.下列哪种措施能最有效防止支原体污染？（A）定期更换超净工作台滤网（B）使用无菌水清洗细胞器皿（C）添加支原体抑制剂（D）严格控制实验环境温湿度

答案：A

解析：超净工作台滤网（通常0.3μm）是防止支原体通过空气传播的关键。支原体抑制剂仅临时有效，清洗和温湿度控制虽重要但非直接防护手段。

5.细胞计数时，使用台盼蓝染色的原理是？（A）染色死细胞（B）染色活细胞（C）区分细胞核和细胞质（D）标记细胞表面抗原

答案：A

解析：台盼蓝是细胞膜选择性通透剂，活细胞膜完整不染色，死细胞膜受损被染色。其他选项中，染色剂如Hoechst标记细胞核，免疫荧光标记表面抗原。

6.以下哪种细胞培养容器最适用于大规模生产？（A）96孔板（B）T25培养瓶（C）细胞工厂（D）培养皿

答案：C

解析：细胞工厂（如搅拌式生物反应器）适合大规模悬浮培养，96孔板仅适用于筛选，T25瓶和培养皿规模过小。国内药企常使用5L-20L细胞工厂。

7.细胞培养基中，哪种成分提供无糖氨基酸？（A）F12（B）HamF-10（C）MEM（D）CoonsF12

答案：B

解析：HamF-10是唯一无糖培养基，其他选项均含葡萄糖。国内药企常用于CHO细胞培养以降低成本。F12和CoonsF12含糖（葡萄糖）。

8.细胞冻存时，理想的细胞活力应维持在不低于？（A）80%（B）90%（C）95%（D）99%

答案：B

解析：细胞冻存复苏后，活力90%以上才算合格，药企标准通常要求≥85%。活力低于80%可能影响后续实验或生产。

9.细胞培养中，pH值应维持在多少？（A）6.5-7.0（B）7.0-7.5（C）7.5-8.0（D）8.0-8.5

答案：B

解析：贴壁细胞最适pH为7.0-7.5，悬浮细胞稍高。国内药企QC标准通常设定为7.2±0.2。过高可能损伤细胞。

10.细胞传代时，哪种比例最适用于常规贴壁细胞？（A）1:2（B）1:3（C）1:4（D）1:5

答案：B

解析：1:3传代最常用，既能保证细胞生长空间，又能获得足够数量。药企SOP常建议1:2-1:4，但1:3最经济高效。

二、多选题（每题3分，共5题）

1.细胞培养中，以下哪些属于无菌操作要点？（A）工作台超净风量≥30L/min（B）手部消毒后戴无菌手套（C）酒精擦洗所有接触面（D）使用无菌滤网过滤所有加液（E）避免谈话和移动

答案：A、B、C、D、E

解析：国内药企GMP要求均包含这些要点，其中超净风量需持续监测，酒精擦拭频率≥30次/小时。

2.细胞冻存过程中，以下哪些属于关键步骤？（A）预冷至-80℃（B）缓慢降温至-20℃（C）直接放入液氮（D）解冻时37℃水浴（E）用培养基稀释3倍后计数

答案：A、B、D

解析：正确流程为：4℃过夜→-20℃过夜→-80℃保存。国内药企要求预冷时间≥2小时。直接入液氮易损伤细胞，解冻需缓慢（37℃水浴5分钟）。

3.细胞污染检测方法包括？（A）相差显微镜观察（B）培养液浊度监测（C）PCR检测支原体（D）活死染色（E）菌落计数

答案：A、C、E

解析：药企常用方法：①显微镜直接观察菌落/炎性物质；②支原体PCR检测（国内药企必检项目）；③培养液变红需排查杂菌。浊度监测仅初步筛选。

4.细胞冻存保护剂配方通常包含？（A）DMSO（B）蔗糖（C）甘露醇（D）青霉素（E）FBS

答案：A、C、E

解析：标准配方：DMSO终浓度5-10%，甘露醇或蔗糖（依细胞类型选择），FBS保护细胞膜。青霉素为防腐剂，不直接用于冻存。

5.细胞培养室环境要求包括？（A）温度22±2℃（B）湿度40%-60%（C）沉降菌≤100CFU/皿（D