凯氏定氮法测定粗蛋白.pptxVIP

牧医工程学院;;一、适用范围;凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。;三、所需试剂

1、硫酸（GB625）

2、混合催化剂

3、氢氧化钠（GB629）

4、硼酸（GB628）

5、混合指示剂

6、0.02mol/l盐酸标准溶液

7、蔗糖（HG3—1001）

8、硫酸铵（GB1396）

9、硼酸吸收液;混合催化剂;盐酸标准液;氢氧化钠溶液;四、仪器设备;牧医工程学院精品在线课程;通风橱内电炉及消煮架;锥形瓶;凯氏烧瓶;刻度吸管;量杯;半微量凯氏蒸馏装置;五、试样的选取制备;六、分析步骤;（2）氨的蒸馏—半微量蒸馏法

将试样消煮液冷却，加入20mL蒸馏水，转入100mL容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，做为试样分解液。将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂的锥形瓶内。蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10-20mL注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加10mL氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水密封，防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。;蒸馏步骤的检验

精确称取0.2g硫酸铵，代替试样，按上述两种步骤进行操作，测得硫酸铵含氮量为21.19%±0.2%，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。;滴定;（二）空白测定;（三）分析结果的表述;1、计算结果如下式;2、重复性