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可见和紫外吸光光度法仪分教程第1页,共41页,星期日,2025年,2月5日最早出现了目视比色法,然后出现了光电比色法和可见分光光度法。这些方法都是依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法,所以又称为吸光光度法。基于光与物质相互作用的性质而建立起来的分析方法称之为光学分析法。第2页,共41页,星期日,2025年,2月5日2.1.1可见吸光光度法的特点(1)灵敏度高:测定浓度下限10-5~10-6mol·L-1或更低。(2)准确度高:相对误差约为1~5%。(3)操作简便快速。(4)仪器性价比高。(5)应用范围广。第3页,共41页,星期日,2025年,2月5日2.1.2光的基本性质
光是一种电磁波,它具有波粒二象性。光的波动性可用波长?、频率?、光速c等参数来描述:c=??光是由光子流组成,光子的能量:E=h?=hc/?(Planck常数:h=6.626×10-34J·S)光的波长越短,或频率越高,其光子所具有的能量就越大。第4页,共41页,星期日,2025年,2月5日各种电磁波依其波长的不同,分别属于下列光谱区间:γ射线:0.001~0.01nm;X射线:0.01~10nm;紫外光:10~380(400)nm;可见光:380~780nm;或(400~800nm);红外线:0.78(800)~1000μm;微波:0.1~10cm;射频:10cm以上。第5页,共41页,星期日,2025年,2月5日单色光:最初指具有单一颜色的光。现指波长范围很窄的光。光的波长范围越窄,其单色性就越好。复合光:由不同波长的光组合而成的波长范围较宽光。第6页,共41页,星期日,2025年,2月5日2.1.3物质对光的选择性吸收(1)光色的互补关系可见光的波长范围:380~780nm。太阳光、白炽灯光的波长是多少呢?实验表明,太阳光等“白光”可以分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光。白光380nm780nm第7页,共41页,星期日,2025年,2月5日将红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光按一定比例混合,就能得到白光。进一步研究表明,两种适当颜色的光以一定比例相混合,也能够得到白光。这两种色光就叫做互补色光。白红橙黄绿青青蓝蓝紫第8页,共41页,星期日,2025年,2月5日不同颜色的可见光具有不同的波长,见p.4,表2.2。第9页,共41页,星期日,2025年,2月5日(2)物质的颜色世界上的物质为什么会有各种各样的颜色呢?CuSO2溶液:KMnO4溶液:K2CrO4溶液:物质呈现不同的颜色,是由于它对光的选择性吸收的结果,显示出的颜色是它吸收的颜色的互补色。第10页,共41页,星期日,2025年,2月5日(3)物质对光的选择性吸收的实质M+热M+荧光或磷光物质的分子、原子或离子具有确定的组成和结构,因而具有一系列不连续的量子化的特征能级。M+h?→M*基态激发态E1E2E1E2E3h?第11页,共41页,星期日,2025年,2月5日如果照射光子的能量(h?)等于其某两个特征能级差(△E)时:?E=E2-E1=h?光子的能量将向物质转移,产生对该特定波长的光吸收,并从基态跃迁至激发态。各种物质具有不同的特征能级,因此会对不同波长的光产生选择性吸收。E1E2E3h?第12页,共41页,星期日,2025年,2月5日1.2.4吸收曲线(AbsorptionCurves)用不同波长的单色光照射试样,测量其对应的吸光度值,可得到反映试样物
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