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分子技术模板试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题

1.下列哪一项不属于DNA复制所必需的物质或条件？

A.DNA模板链

B.4种脱氧核苷三磷酸（dNTPs）

C.RNA聚合酶

D.解旋酶

2.在PCR反应体系中，引物的作用是？

A.催化DNA链延伸

B.提供模板DNA

C.切割DNA双链

D.特异性地结合到模板DNA的特定序列上，并作为DNA聚合酶的起始点

3.限制性内切酶识别和切割DNA的特性主要是？

A.对温度敏感

B.对pH值敏感

C.具有特定的识别序列和切割位点

D.需要RNA作为辅助因子

4.DNA凝胶电泳分离核酸片段的主要依据是？

A.核酸片段的碱基序列

B.核酸片段的带电性质和大小

C.核酸片段的稳定性

D.核酸片段的浓度

5.下列哪种技术通常用于检测样本中是否存在特定的RNA序列？

A.SouthernBlotting

B.NorthernBlotting

C.ELISA

D.PCR

6.在基因克隆过程中，将目的基因片段插入到载体DNA中常用的工具是？

A.DNA连接酶

B.限制性内切酶

C.DNA聚合酶

D.转化菌

7.Sanger测序法的基本原理是？

A.DNA分子杂交

B.依赖DNA聚合酶的链式反应，并使用不同荧光标记的dNTPs进行终止测序

C.通过电泳分离不同大小的RNA片段

D.利用限制性内切酶进行DNA片段分析

8.下列哪项是PCR技术的关键步骤之一？

A.DNA变性

B.蛋白质翻译

C.mRNA转录

D.RNA复制

9.粘性末端连接是指？

A.DNA片段在3端被切割产生突出末端

B.DNA片段在5端被切割产生突出末端

C.限制性内切酶切割后产生的带有互补单链突出的DNA片段端部，可通过碱基互补配对连接

D.载体和目的基因片段直接通过非特异性力连接

10.基因诊断技术主要利用了分子生物学中的哪些原理？（多选，请在答题卡上标记）

A.DNA杂交

B.PCR

C.基因测序

D.电泳

二、填空题

1.DNA的双螺旋结构模型由______和______于1953年提出。

2.限制性内切酶识别的序列通常具有______性。

3.PCR反应一般包括三个主要温度阶段：______、______和______。

4.用于分离和鉴定核酸片段的凝胶电泳最常用的凝胶基质是______和______。

5.基因克隆中，用于携带外源DNA片段的分子称为______。

6.在DNA测序中，合成终止法的核心技术是使用了带有不同标记的______。

7.将目的基因导入宿主细胞的过程称为______。

8.mRNA是以______链为模板，按照______原则转录而来的。

三、判断题

1.(√)DNA聚合酶可以在没有模板的情况下合成DNA链。

2.(×)几乎所有的限制性内切酶都在DNA的同一recognitionsequence内切割，产生平末端。

3.(√)PCR技术的关键在于能够特异性地扩增目标DNA片段。

4.(√)凝胶电泳是分离和鉴定核酸片段最常用的方法之一。

5.(×)基因探针是放射性同位素标记的DNA或RNA片段，用于检测样本中是否存在互补的核酸序列。

6.(√)载体质粒必须具备自我复制的能力和选择标记，以便在宿主细胞中扩增和筛选含有目的基因的重组质粒。

7.(×)Sanger测序法是目前唯一能够对整个基因组进行测序的方法。

8.(√)基因诊断可以在疾病的早期甚至产前进行。

9.(×)中心法则仅描述了DNA到DNA的遗传信息传递。

10.(√)DNA杂交的特异性取决于核酸分子间碱基互补配对的程度。

四、简答题

1.简述PCR技术的基本原理及其主要应用。

2.比较限制性内切酶识别序列的特点和DNA连接酶的作用机制。

3.简述凝胶电泳的基本原理及其在分子生物学研究中的作用。

4.简述基因克隆的基本步骤及其在基因功能研究中的应用。

五、论述题

试述PCR技术在现代生物学研究和应用中的重要性，并分析其可能存在的局限性。

试卷答案

一、选择题

1.C

解析