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;;问题式预习;2.实例
下列属于选择培养基的是_________。
①80℃条件下的培养基
②pH=7条件下的培养基
③牛肉膏蛋白胨培养基
④以尿素为唯一氮源的培养基
⑤添加青霉素的培养基;二、微生物的选择培养
1.培养基:_______________。
2.样品处理:对样品进行充分稀释。
3.接种方法:______________法。;4.操作过程;(1)对涂布器进行消毒灭菌的步骤分别是______。
(2)E所示步骤中向培养基加入菌液的体积是__________。
(3)A所示步骤中试管中加入1mL菌液和9mL_________,依次等比稀释。
(4)正确的操作步骤顺序是__________。
(5)接种完毕后,将平板______,放入__________的恒温培养箱中培养。;三、微生物的数量测定
1.稀释涂布平板法
(1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的____________。
(2)计数原则
①一般选择菌落数为_________的平板计数。
②在同一稀释度下,应至少对___个平板进行重复计数,然后求出平均值。
(3)不足:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是___个菌落,所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目___。;2.显微镜直接计数法
(1)计数工具:显微镜、__________________________。
(2)不足:因计数结果一般是________________的总和,故比活菌的实际数目___。;四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1.原理:绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但只有能合成______的微生物才能分解尿素。利用以______作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出____________的细菌。;2.步骤;3.操作提示
基于对土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作的理解,判断下列关于实验操作的说法正确的是____________。
①本实验耗时长,应提前制订好计划,提高效率
②本实验用到的器材比较多,应该对试管和平板做好标记
③取土样的铁铲和取样纸袋使用前都需要灭菌
④为了防止杂菌污染,从酒精中取出的涂布器应该直接在酒精灯火焰上充分燃烧灭菌
⑤过热的涂布器不能直接放在盛有酒精的烧杯中;1.[教材P18正文]在稀释涂布平板法中,为何需至少涂布3个平板?
提示:作为重复实验,统计时取平均值,以减少偶然因素对实验结果的影响,增强实验结果的说服力。
2.[教材P18正文]采用稀释涂布平板法接种,为什么统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低?
提示:因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。;3.[教材P19“探究·实践”]如何借助生物化学的方法来鉴定所分离的尿素分解菌?
提示:使用以尿素为唯一氮源的培养基,尿素分解菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,可确定该细菌能够分解尿素。;1.利用稀释涂布平板法统计菌落数目时,统计的菌落数就是活菌的实际数。()
2.统计菌落数目时为保证结果准确,一般选择菌落数目最多的平板进行统计。()
3.利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。()
4.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养。();5.涂布接种时,需将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中,然后取出并用酒精灯外焰灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后再使用。()
6.一般选择菌落数大于300的平板进行计数。()
7.显微镜直接计数法统计的都是稀释液中的活菌。();任务型课堂;探究1.如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物?
提示:从大豆田土壤中取土样,利用缺乏氮源的培养基可分离出固氮微生物。
探究2.要分离出分解纤维素的微生物,应在什么样的环境中取土样?应配制什么样的培养基?
提示:应从富含纤维素的环境中取土样,如树林中多年落叶形成的腐殖土。应配制以纤维素为唯一碳源的培养基。
探究3.根据选择培养的原理,如何筛选出耐酸菌?
提示:可将培养基的pH调至酸性,再接种细菌培养。;[评价活动]
1.解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养,甲菌菌落周围呈现深蓝色,乙菌菌落周围不变色。下列说法错误的是()
A.甲菌属于解脂菌
B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力;B解析:根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”可知,甲可以分泌脂肪酶,将脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸使醇溶青琼脂平板变为深蓝色,因此甲
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