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抗核抗体谱(IgG)检测标准操作规程

目的

规范抗核抗体谱(IgG)检测，保证结果的准确性。

适用范围

检验科免疫组工作人员。

试剂规格名称与组成

型号名称：ANA谱1

靶抗原：nRNP/Sm，Sm，SS-A，Ro-52，SS-B，Scl-70，Jo-1，CENPB，dsDNA，核小体，组蛋白，核糖体P蛋白

类型：IgG

基质：抗原包被的检测膜条

规格：16×01(16)

4.预期用途：用于体外定性检测人血清或血浆中的抗nRNP、Sm、SS-A（天然SS-A和Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENPB、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白和AMAM2共14种不同抗原IgG类抗体。

5.适应症：夏普综合征（MCTD），系统性红斑狼疮（SLE），干燥综合征，进行性系统性硬化症，多肌炎皮肌炎、重叠综合征、局限型进行性系统性硬化症（CREST综合征），原发性胆汁性肝硬化。

6.临床意义：抗核抗体识别是各种细胞核组分（细胞核的生化成份）[1,2]，包含核酸、细胞核蛋白及核糖蛋白。可特征性地出现于许多疾病中，尤其是风湿性疾病[3,4,5]。在炎症性风湿性疾病中，这些抗核抗体的阳性率在20%到100%之间，以风湿性关节炎的阳性率最低，在20%至40%之间。因此，ANA鉴别诊断在对个别风湿疾病的确认十分必要，而且对自身免疫性疾病的进一步诊断也很有价值。[3,6,7,8,9,10,11]

风湿疾病

—夏普综合征（混合结缔组织病＝MCTD)[8]

—系统性红斑狼疮（SLE)[8,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22]

—干燥综合征（原发性干燥综合征）[5],

—系统性硬化症（系统性硬皮病,SSc)[1,23],

—局限型系统性硬化症（CREST综合征）[28]

—多肌炎/皮肌炎[12,15]

—类风湿性关节炎[5]

7.主要组成成分：

成份

规格

规格

标识

1.包被抗原的检测膜条：nRNP/Sm、Sm、SS-A（天然SS-A和Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENPB、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P蛋白、AMAM2。

16条

4x16条

STRIPS

2.阳性对照

人IgG，100倍浓缩

1x0.02ml

4x0.02ml

POSCONTROL100x

3.酶结合物

碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG，10倍浓缩

1x3ml

4x3ml

CONJUGATE10x

4.样本缓冲液

直接使用

1x100ml

3x100ml

SAMPLEBUFFER

5.清洗缓冲液

10倍浓缩

1x50ml

1x100ml

WASHBUFFER10x

6.底物液

NBT/BCIP（四唑硝基苯胺兰/5-溴-4-氯啶-3-吲哚-磷酸盐），直接使用

1×30ml

4×30ml

SUBSTRATE

7.温育盘

2x8槽

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8.产品说明书

1份

1份

LOT 试剂批号 储存温度

IVD 体外检测 未开封可稳定至

8.储存条件及有效期：2-8°C保存，不要冷冻。未开封前，除非特别说明，试剂盒自生产日起可稳定18个月。稀释后的酶结合物和清洗缓冲液需在一个工作日内用完。

9.样本要求

样本：人血清或EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝的血浆。

稳定性：待检患者样本于2-8°C可稳定14天，稀释后的样本应在同一个工作日内检测。

样本稀释：

患者样本用样本缓冲液1:101稀释，如可取15ul血清用1.5ml样本缓冲液稀释并用漩涡混匀器充分混匀。不可用加样器混匀。

10.检验方法

10.1试剂的准备和稳定性

注意：使用前所有试剂均必须于室温（18-25°C）平衡30分钟。从第一次使用起，试剂盒如保存在2-8°C，并且在没有污染的情况下，可稳定至所标示的有效期。

-包被抗原的检测膜条：直接使用。为防止膜条发生冷凝，只有当膜条平衡到室温后才可打开包装。取出膜条后应立即密封好原包装并将其保存于2-8°C。

-阳性对照：100倍浓缩。使用时用干净的吸管从瓶中吸取所需阳性对照，用样本缓冲液1:101稀释如：15ul阳性对照用1.5ml样本缓冲液稀释并充分混匀。已稀释的阳性对照应在同一个工作日用完。

检测膜条上有一条质控带，如果质控带出现强的颜色反应说明实验操作