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第七章??细菌感染的检查与防治

感染性疾病的病因学诊断

确定感染的微生物,为临床诊断提供根据。

由于该诊断是通过确定感染的微生物而确立的,故称微生物学诊断(病原学诊断)。

关系到正确的治疗、控制和预防。

;检查方法

微生物学(细菌的形态学检查、分离培养和鉴定)

免疫学(查Ag或Ab)

分子生物学(查核酸);

;现在是4页\一共有42页\编辑于星期四;(一)细菌形态学检查

针对一些在形态与染色上具有特征的

病原菌。

1)光学显微镜

2)染色法检查

;(二)细菌分离培养与鉴定

主要内容:

1、细菌分离培养—菌落大小、色素、溶血;

2、涂片、染色、镜检。

尤其用于在形态、排列和染色性方面无特

征的某些病原菌的检查。

阳性率高于直接镜检,但时间长。

;革兰染色原理:细胞壁结构不同。

G+结构致密、肽聚糖层厚、乙醇不易透入;乙醇使胞壁脱水形成一道屏障,短暂阻止结晶紫-碘复合物从胞内渗出;

G-疏松、肽聚糖层薄、外膜均含大量脂质,易被乙醇溶解,使胞壁通透性增高,胞内结晶紫-碘复合物被溶解脱出而脱色。;革兰染色实际意义---

鉴别细菌

选择用药

研究细菌致病性

其它染色有:

单染色、抗酸染色、特殊染色等。;抗酸染色法;特殊染色法:鞭毛染色

荚膜染色

负染色法;2、生化反应

现有“程序控制的自动分析仪”。

3、血清学鉴定:用已知Ab鉴定从标本中分离培养出的未知菌(玻片法简便易行)。

分群、分型;4、动物试验

用于:①分离鉴定病原菌;

②测定细菌的毒力及产毒性

选用高度易感、健康等条件的动物。

;如:毒素-抗毒素中和试验---小白鼠;

钩端螺旋体---幼龄豚鼠、金地鼠。

;5、药物敏感试验

指导临床选择用药,及时治疗和控制感

染有重要意义。

;

;6、自动微生物鉴定和药敏分析系统:

微生物编码鉴定技术---数据库

微量培养

自动监测分析

自动记录药敏结果

;(三)细菌抗原的检测

用已知Ab检测未知抗原(Ag-Ab反应)。

优点--特异、灵敏、简便

方法:玻片凝集、协同凝集、间接血凝试验、乳胶凝集、对流免疫、酶免疫技术、免疫荧光技术。

;载体颗粒

SPA、乳胶;酶联免疫吸附试验(ELISA,间接法)

;对流免疫电泳;免疫扩散试验;(四)细菌核酸的检测

核酸杂交、PCR、16SrRNA基因测序、基因芯片等技术。

更特异、敏感、快速;5’;检测PCR产物;三、细菌感染的血清学诊断(serologicaldiagnosis)

查Ab:检测病人血液中由于细菌感染而产生的特异性抗体,辅助临床诊断。

广泛用于多种病原体的微生物诊断和流行病学调查。

;双份血清:早期(急性期)

晚期(恢复期)

结果:根据双份血清中测到的抗体效价,

若升高4倍或以上,有辅助诊断价值。

方法:凝集试验,中和试验,ELISA等。

;现在是27页\一共有42页\编辑于星期四;致病菌的检验程序;第二节细菌感染的特异性预防

一、人工主动免疫(artificialactiveimmunization)

(一)疫苗、类毒素

1、死疫苗—伤寒、霍乱等。

2、活疫苗—BCG、鼠疫等。

;疫苗接种;现在是31页\一共有42页\编辑于星期四;;3、亚单位疫苗(subunitvaccine)

利用现代生物技术,除去细菌或病毒无关有害成分,分离提取纯化对人体有保护性的抗原。如:肺炎链球菌、脑膜炎球菌的荚膜多糖疫苗,+佐剂即成。

接种少量抗原可使人体产生良好免疫应答,且接种反应轻微。;优点

a、去除引起副反应的物质;

b、因不含核酸可免去减毒活疫苗回复突

变及灭活全疫苗发生感染性复活的可能;

c、消除肿瘤病毒潜在的致癌作用;

d、可利用化学试剂分解病毒体。;4、基因工程疫苗

本质上是亚单位疫苗

如:含宋内志贺菌表面抗原质粒的伤寒沙门菌Ty21a

优点:安全、经济、可批量生产;

缺点:抗原的回收纯化困难。

;5、重组载体疫苗

将抗原表位的目的基因片段转入减毒的病毒或细菌。

形式:整合于病毒、细菌基因组或质粒

本质:活疫苗;6、核酸疫苗(DNAVaccine

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