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真菌发酵工艺优化及其生物活性物质提取研究
目录
内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1.1微生物发酵技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.1.2真菌在生物活性物质生产中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.1.3研究目的与预期目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.2文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
1.2.1国内外真菌发酵的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.2.2生物活性物质提取方法的比较分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
1.2.3本研究的创新点与贡献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
2.1.1菌种选择与培养条件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
2.1.2发酵基质与培养基配方．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
2.1.3实验所用仪器设备与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
2.2.1真菌发酵工艺的优化设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
2.2.2生物活性物质的提取与纯化技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
2.2.3生物活性物质含量测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
结果分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
3.1发酵工艺参数对生物活性物质产量的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
3.1.1温度、pH值、接种量等关键因素的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
3.1.2发酵过程中生物活性物质的变化趋势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
3.1.3工艺参数优化前后的对比分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
3.2生物活性物质的结构鉴定与性质分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
3.2.1高效液相色谱质谱联用(HPLCMS)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
3.2.2X射线衍射(XRD)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
3.2.3红外光谱(FTIR)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
3.2.4核磁共振(NMR)分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
3.3生物活性物质的生物活性评价．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
3.3.1体外细胞毒性测试．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
3.3.2体内动物模型试验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
3.3.3临床前安全性评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53
结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54
4.1主要研究结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
4.1.1发酵工艺优化的效果评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
4.1.2生物活性物质提取效率的提升．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59
4.1.3生物活性物质的生物活性验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61
4.2研究局限性与不足．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．65
4.2.1实验条件的限制性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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