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先天下之忧而忧，后天下之乐而乐。——范仲淹
专题1基因工程知识系统表解
【专题总系统】
【专题分系统】
1.1DNA重组技术的基本工具
来源主要从原核生物中分离纯化出来。
种类已从近300种不同的微生物中分离出约4000种限制酶。
限制性内识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列（大多数识别序列
核酸内容由6个核苷酸组成，如EcoRI、SmaI；也有少数识别序列由4、
切酶―及5或8个核苷酸组成），并使每一条链中特定部位的两个核苷
作
“分子特酸之间的磷酸二酯键断开，参见教材图1-2，即具有特异性。
手术点
用
刀”切割产生的DNA片段末端通常有两种形式（参见教材图1-3）：
DNA结
①黏性末端：在识别序列中轴线两侧切开
重组果
②平末端：在识别序列中心轴线处切开
技术
将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核
的基作用
DNA连苷酸之间的磷酸二酯键。
本工
接酶―种类来源作用
具
“分子大肠杆只能连接互补的黏性末端。
·
EcoliDNA连接酶
缝合种类菌
针”T噬菌连接互补的黏性末端和平末端（效
4
TDNA连接酶
4
体率低）。
基因进入是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体（即
质粒概
受体细胞拟核DNA）之外，并具有自我复制能力的双链
举例（常念
的载体―环状DNA分子。
用）
“分子运特●具有一个至多个限制酶切点，供外源DNA片
君子忧道不忧贫。——孔丘
输车”点段插入其中；
●可在受体细胞中自我复制或整合到染色体
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