高二生物基因工程的基本操作程序.pptVIP

【尝试解答】(1)反转录酶(或逆转录酶)分解RNA(2)稳定(3)DNA聚合酶催化⑤过程的酶耐高温(4)60第26页，共43页，星期日，2025年，2月5日【解析】根据图示可以看出，该过程是RNA在逆转录酶的催化作用下形成cDNA(负链DNA)，构成RNA—DNA中间体。中间体中的RNA再经过RNA酶H水解，而以剩下的负链DNA复制成双链DNA的过程。①过程是由RNA合成DNA的过程，需要逆转录酶进行催化。②过程是以单链DNA复制获得双链DNA的过程需要DNA聚合酶催化。⑤属于双链DNA复制的过程，需要DNA聚合酶催化。⑤过程在70～75℃环境下进行，所需要的酶应该能够耐高温。第27页，共43页，星期日，2025年，2月5日【互动探究】(1)上述过程中需要限制酶和DNA连接酶吗？(2)由mRNA逆转录形成的DNA具有启动子吗？【提示】(1)不需要。(2)无。【探规寻律】(1)PCR技术不需要解旋酶，但需利用90～95℃高温使DNA分子解旋。(2)PCR技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。(3)PCR技术是对已知目的基因的扩增；从基因库中获取目的基因，是先找出含有目的基因的细胞，再通过一定的技术手段获取目的基因。第28页，共43页，星期日，2025年，2月5日基因表达载体的构建和导入受体细胞1．基因表达载体的构建第29页，共43页，星期日，2025年，2月5日特别提醒①用限制酶切割载体和含目的基因的DNA分子时，可以使用不同的限制性核酸内切酶,但是必须切出相同黏性末端。②不同基因可以拼接的原因：不同生物的基因具有相同的结构和化学组成，都是双螺旋结构，都由四种脱氧核糖核苷酸组成，都遵循相同的碱基互补配对原则：A—T，G—C。第30页，共43页，星期日，2025年，2月5日2．目的基因的导入(1)不同受体细胞的常用导入方法生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射法Ca2＋处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞第31页，共43页，星期日，2025年，2月5日返回返回高二生物基因工程的基本操作程序第1页，共43页，星期日，2025年，2月5日课标领航1．阐述基因工程的原理。2．掌握并理解基因工程的基本操作程序。3．尝试设计某一转基因生物的研制过程。【重点】基因工程的原理及基本操作程序。【难点】基因文库；PCK扩增过程；目的基因的检测。第2页，共43页，星期日，2025年，2月5日看到这幅图，联系基因工程，你有何感想？让植物和动物合为一体可能不好实现，但我们能不能通过基因工程技术，让这一愿望实现呢？实际上，基因工程技术已经实现了人们的许多看似异想天开的愿望或构想。情景导航第3页，共43页，星期日，2025年，2月5日 核心要点突破基础自主梳理知能过关演练1．2基因工程的基本操作程序第4页，共43页，星期日，2025年，2月5日基础自主梳理一、基因工程的基本操作程序1．目的基因的获取。2．______________的构建。3．将目的基因导入_________。4．目的基因的检测与鉴定。基因表达载体受体细胞第5页，共43页，星期日，2025年，2月5日二、目的基因的获取1．目的基因：主要是指编码________的结构基因。2．获取方法(1)从基因文库中获取①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多______片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。蛋白质DNA第6页，共43页，星期日，2025年，2月5日所有第7页，共43页，星期日，2025年，2月5日思考感悟1．怎样从基因文库中得到我们需要的目的基因？【提示】可以根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的翻译产物蛋白质等特性来获取目的基因。第8页，共43页，星期日，2025年，2月5日(2)利用PCR技术扩增目的基因含义一项在生物体外___________________的核酸合成技术原理DNA_________前提条件有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成______扩增过程目的基因DNA受热→变性解旋为_____→引物与单链相应互补序列结合→在_____________作用下延伸→形成新的DNA分子→循环重复以指数形式扩增结果以指数形式扩增：2n复制特定DNA片段双链复制引物单链DNA聚合酶第9页，共43页，星期日，2025年，2月5日(3)人工合成法：如果基因较小，核苷