先天性巨结肠肠管组织中miRNA的差异表达及其在发病机制与临床应用中的关键意义.docxVIP

先天性巨结肠肠管组织中miRNA的差异表达及其在发病机制与临床应用中的关键意义

一、引言

1.1先天性巨结肠概述

先天性巨结肠（Hirschsprungsdisease，HD），又被称作肠管无神经节细胞症（Aganglionosis），是小儿外科中较为常见的先天性消化道畸形。其主要病理特征为在胚胎发育的5-12周时，神经脊细胞迁移出现障碍，致使末端肠壁区域神经节细胞功能异常或者缺失。受累肠段的远端肌间神经细胞缺如，使得肠管产生痉挛性收缩，管腔变窄，进而丧失蠕动能力，而近端肠段则会出现继发性代偿扩张与肥厚。在新生儿胃肠道畸形里，先天性巨结肠的发病率仅次于直肠肛门畸形，位居第二，全球发病率大约为出生婴儿的1/5000，男性发病率约为女性的4倍，并且存在一定的遗传易感性，属于多基因与环境共同作用的复杂疾病。

先天性巨结肠患儿的临床表现多样，新生儿时期典型症状为出生后24-48小时内未排胎便，同时伴有腹胀、呕吐，呕吐物可能为胆汁性物质。随着病情发展，肠内容物长期滞留会导致显著腹胀，便秘成为主要症状之一，严重者需依赖灌肠才能排便。部分患者由于近端肠段继发性感染或炎症，还可能出现便秘与腹泻交替的情况。此外，肠道功能障碍会引发食物积滞，常表现为烦躁、厌食及反复呕吐，长期的便秘与吸收障碍会进一步导致患儿营养不良、贫血以及生长发育迟缓。若未能及时治疗，还可能引发肠梗阻、肠穿孔或急性肠炎等严重并发症，危及生命。

当前，先天性巨结肠的临床诊断主要依据患儿的临床表现，如上述的排便异常、腹胀等症状，同时结合相关影像学检查，例如腹部X线平片可显示低位肠梗阻征象，钡剂灌肠检查能观察到狭窄段、移行段和扩张段肠管，对诊断有重要提示意义。直肠黏膜活检则是确诊的金标准，通过检测肠壁神经节细胞的有无来明确诊断。然而，这些诊断方法存在一定局限性，临床表现缺乏特异性，容易与其他胃肠道疾病混淆，影像学检查对于早期或不典型病例的诊断准确性有待提高，直肠黏膜活检属于有创检查，可能给患儿带来痛苦和风险。

在治疗方面，手术是主要的治疗手段，包括经肛门Soave手术、Swenson手术、Duhamel手术等，手术目的是切除无神经节细胞的肠段，恢复肠道正常的解剖结构和生理功能。虽然手术治疗在一定程度上能够改善患儿的症状，但术后仍可能出现一些并发症，如吻合口漏、吻合口狭窄、便秘复发、小肠结肠炎等，这些并发症不仅影响患儿的生活质量，还可能需要再次手术治疗，给患儿及其家庭带来沉重的负担。因此，深入探究先天性巨结肠的发病机制，寻找更为有效的早期诊断方法和治疗靶点具有重要的临床意义。

1.2miRNA简介

miRNA，即微小核糖核酸（microRNA），是一类内生的、长度约18-25个核苷酸的小单链非编码RNA分子。它由DNA转录产生，但并不翻译成蛋白质，而是通过独特的作用机制在基因表达调控中发挥关键作用。miRNA的产生过程较为复杂，首先在细胞核内由RNA聚合酶Ⅱ转录生成初级miRNA（pri-miRNA），pri-miRNA在核酸酶Drosha和其辅助因子Pasha的作用下被加工成约70-100个核苷酸的发夹结构的前体miRNA（pre-miRNA）。随后，pre-miRNA在转运蛋白Exportin-5的协助下被转运至细胞质中，再由核酸酶Dicer切割成为成熟的miRNA。

成熟的miRNA通过碱基互补配对的方式与靶基因的3＇非翻译区（3UTR）部分或完全互补结合，进而对靶基因的表达进行转录后调控。当miRNA与靶mRNA的3UTR完全互补时，会促使靶mRNA降解；而当两者不完全互补时，则主要抑制靶mRNA的翻译过程，从而减少相应蛋白质的合成。值得注意的是，一个miRNA可以调控多个靶基因，一个基因也可受到多个miRNA的调控，这种复杂的调控网络使得miRNA能够精细地调节细胞内的各种生物学过程。

大量研究表明，miRNA在生物的各项生理活动以及生长发育过程中都扮演着不可或缺的角色。在胚胎发育过程中，miRNA参与调控细胞的分化和组织器官的形成，例如miR-1和miR-133在心肌细胞的分化和发育中发挥重要作用。在细胞的增殖、凋亡和应激反应等过程中，miRNA也起着关键的调节作用，如miR-21可以通过抑制其靶基因的表达来促进细胞增殖和抑制细胞凋亡。此外，miRNA功能异常与多种复杂疾病的发生发展密切相关，在肿瘤领域，某些miRNA可作为癌基因或抑癌基因参与肿瘤的发生、发展、转移和耐药等过程，如miR-155在多种肿瘤中表达上调，促进肿瘤细胞的增殖和侵袭；在心血管疾