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由于生物体内、体外可能存在的差异,可在体外加入哺乳动物(如大鼠)微粒体酶系统,使待测物活化,使Ames试验的准确率达80-90%。第四节基因突变及修复三、诱变剂与致癌物质——Ames试验第62页,共96页,星期日,2025年,2月5日第63页,共96页,星期日,2025年,2月5日证明Ames试验重要性的应用实例:国外曾开发了一种降低妇女妊娠反应的药物“反应停”,由于其药效显著,在60-70年代十分流行,但随后人们就发现畸形儿的出生率明显增高,而且生产畸形儿的妇女大多曾服用“反应停”,后来采用Ames试验发现这种物质的确具有很强的致突变作用,因此这种药物被禁止使用.但如果能在这种药物上市之前就进行Ames试验检测,那么这种大量出生畸形儿的悲剧完全可以避免。第64页,共96页,星期日,2025年,2月5日第五节细菌基因转移和重组细菌的三种水平基因转移形式接合转导自然转化第65页,共96页,星期日,2025年,2月5日一、细菌的接合作用(conjugation)通过细胞与细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程1.实验证据1946年,JoshuaLederberg和EdwardL.Taturm细菌的多重营养缺陷型杂交实验第66页,共96页,星期日,2025年,2月5日证实接合过程需要细胞间的直接接触的“U”型管实验(BernardDavis,1950)第67页,共96页,星期日,2025年,2月5日2.机制(大肠杆菌的接合机制)接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导F因子通常为环状,大小约为细菌组DNA的2%,94.5kb,上面有编码细菌产生性菌毛(sexpili)及控制接合过程进行的20多个基因。含有F因子的细胞:“雄性”菌株(F+),其细胞表面有性菌毛不含F因子的细胞:“雌性”菌株(F-),细胞表面没有性菌毛第68页,共96页,星期日,2025年,2月5日第二节微生物的基因组结构三、微生物基因组结构的特点2、真核微生物(啤酒酵母)的基因组1)典型的真核染色体结构;2)没有明显的操纵子结构;啤酒酵母基因组大小为13.5×106bp,分布在16条染色体中。3)有间隔区(即非编码区)和内含子序列;4)重复序列多;第30页,共96页,星期日,2025年,2月5日第三节质粒质粒(plasmid):一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。转座因子(transposableelement):位于染色体或质粒上的一段能改变自身位置的DNA序列,广泛分布于原核和真核细胞中。质粒和转座因子是细胞中除染色体以外的另外两类遗传因子第31页,共96页,星期日,2025年,2月5日第三节质粒一、质粒的分子结构通常以共价闭合环状(covalentlyclosedcircle,简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中;也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒;质粒分子的大小范围多在1kb到100Kb左右;第32页,共96页,星期日,2025年,2月5日第三节质粒二、质粒的主要类型在某些特殊条件下,质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能,从而使宿主得到生长优势。质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的;第33页,共96页,星期日,2025年,2月5日二、质粒的主要类型1、致育因子(Fertilityfactor,F因子)又称F质粒,其大小约100kb,这是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象(接合作用)有关的质粒。携带F质粒的菌株称为F+菌株(相当于雄性),无F质粒的菌株称为F-菌株(相当于雌性)。第三节质粒第34页,共96页,星期日,2025年,2月5日二、质粒的主要类型1、致育因子(Fertilityfactor,F因子)F因子能以游离状态(F+)和以与染色体相结合的状态(Hfr)存在于细胞中.有关内容在讲细菌的接合作用(conjugation)时具体介绍第三节质粒第35页,共96页,星期日,2025年,2月5日2、抗性因子(Resistancefactor,R因子)主要包括抗药性和抗重金属二大类,简称R质粒。R100质粒(89kb)可使宿主对下列药物及重金属具有抗性:汞(mercuricion,mer)四环素(tetracycline,tet)链霉素(Streptomycin,Str)、磺胺(Sulfonamide,Su)、氯霉素(Chlorampenicol,Cm)夫西地酸(fusidicacid,fus)并且负责
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