常用玻璃器皿的清洗包扎与灭菌一目的要求1.学习玻璃器皿的清.pptVIP

常用玻璃器皿的清洗包扎与灭菌一目的要求1.学习玻璃器皿的清.ppt

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一、目的要求

1.学习玻璃器皿的清洗、烘干、包扎技术。

2.学习高压蒸汽灭菌的基本原理和操作方法。常用玻璃器皿的清洗、包扎与灭菌二、实验材料

培养皿、试管、棉花、纱布、棉线、报纸、聚丙烯薄膜,高压蒸汽菌锅、电热干燥箱等。

三、实验内容

(一)玻璃器皿的清洗:

1.新购的玻璃器皿的洗涤

将器皿放入2%盐酸溶液中浸泡数小时,以除去游离的碱性物质,最后用流水冲净。

2.常用旧玻璃器皿的洗涤

确实无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用前后,可按常规用洗衣粉水进行刷洗;

吸取过化学试剂的吸管,先浸泡于清水中,再进行清洗。3.带菌玻璃器皿的洗涤凡实验室用过的菌种以及带有活菌的各种玻璃器皿,必须经过高温灭菌或消毒后才能进行刷洗:(1)带菌培养皿、试管、三角瓶等物品,做完实验后放入消毒桶内,用0.1MPa灭菌20~30min后再刷洗。(2)带菌载玻片及盖玻片,使用后不得放在桌子上,立即分别放入盛有0.25%新洁尔灭溶液的玻璃缸内消毒24h后,用夹子取出经清水冲干净;如用于细菌染色的载玻片,需放入50g/L肥皂水中煮沸10min,再用清水洗干净。最后将载玻片浸入95%酒精中,取出晾干,保存备用。(二)玻璃器材的晾干或烘干1.玻璃器皿若不急用,可放在实验室中自然晾干;2.玻璃器皿若急用,可将玻璃器皿放在托盘中,再放入干燥箱内,60~80℃烘干。(三)器皿的包扎:要使灭菌后的器皿仍保持无菌状态,需在灭菌前进行包扎。1.培养皿的包扎:洗净的培养皿烘干后每6~8套叠在一起,用报纸包扎卷成一筒,然后进行灭菌。培养皿包扎方法如下:培养皿由一个平面圆盘状的底和一个盖组成。现在我们包扎所用的培养皿其规格为直径90mm。取一张双层报纸,平放于桌面,将8个培养皿用手扶住,整齐地放在报纸边缘,居中放置(注意:培养皿盖方向一致)。培养皿与报纸紧贴,将报纸卷起,用手扶住,将培养皿两边的报纸折叠,注意报纸要与培养皿贴合紧。一边滚动培养皿,一边将报纸沿着培养皿的边缘折叠紧,避免太松动,报纸折叠覆盖培养皿的面积大约为培养皿的一半。包扎到最后,将培养皿立起来,将多余的报纸扎到报纸内部压紧,然后以同样的方法扎好另外一端。用橡皮筋扎好,即可用于灭菌。2.试管:试管需要做合适的棉塞,棉塞可起过滤作用,避免空气中的微生物进入容器。制作棉塞时,要求棉花紧贴玻璃壁,没有皱纹和缝隙,松紧适宜。过紧易挤破管口和不易塞入;过松易掉落和污染。棉塞的长度不小于管口直径的2倍,约2/3塞进管口。试管棉塞的制作和包扎:取10cm*10cm的一块纱布,纱布中央位置覆盖于试管口,取棉花塞入试管口3cm定型,用棉线扎进紧。将棉塞塞入试管口,取出棉塞时可听到清脆的响声即为合格的棉塞。取聚丙烯薄膜,将其一端用橡皮筋扎紧,将若干棉塞放入聚丙烯薄膜袋内,将另一端用橡皮筋扎紧即可用于灭菌。试管的包扎:取聚丙烯薄膜,将其一端用橡皮筋扎紧,将若干试管整齐放入聚丙烯薄膜袋内,将另一端也用橡皮筋扎紧即可用于灭菌。包扎试管3.吸管:洗净、烘干后的吸管,在吸口的一头塞入少许脱脂棉花,以防在使用时造成污染。塞入的棉花量要适宜,多余的棉花可用酒精灯火焰烧掉。每支吸管用一条宽约4~5cm的纸条,以30~50℃的角度螺旋形卷起来,吸管的尖端在头部,另一端用剩余的纸条打成一结,以防散开,标上容量,若干支吸管包扎成一束进行灭菌。使用时,从吸管中间拧断纸条,抽出试管。(四)玻璃器皿等的灭菌----高压蒸汽灭菌法1.高压蒸汽灭菌锅构造:锅盖:锅盖上有安全阀、放气阀(放气阀下方有软管相连)、压力表(红色线指示温度,黑色线指示压力)。紧固螺栓:用于紧固锅盖。灭菌桶:用于装灭菌物品。电热管:电源开关:排水阀:灭菌锅不使用时,可通过放水阀将锅内的水排出。电源插头:

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