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青娥方对骨吸收的调控机制：基于FAK/SRC/p130Cas通路的深入探究

一、引言

1.1研究背景与意义

骨质疏松症（Osteoporosis,OP）是一种以骨量减少、骨组织微结构破坏，导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身性骨骼疾病，多见于绝经后女性和老年男性。据统计，我国OP的发病率呈逐年上升趋势，至2050年我国OP患者数量可达3亿，其致死率、致残率较高，给社会和家庭带来沉重负担。随着我国人口老龄化的加重，OP已成为不可忽视的严重健康问题。

骨吸收是骨质疏松症发生发展的关键环节，破骨细胞在骨吸收过程中发挥着至关重要的作用。破骨细胞是一种多核的，具有骨吸收功能的骨组织细胞，其通过分泌酸性物质和蛋白酶，溶解骨基质中的矿物质和有机成分，导致骨量丢失。当骨吸收超过骨形成时，就会导致骨质疏松症的发生。因此，深入研究骨吸收的分子机制，寻找有效的干预靶点，对于骨质疏松症的防治具有重要意义。

青娥方作为治疗骨质疏松症的经典方剂，始见于《太平惠民和剂局方》，主要由补骨脂、核桃仁、杜仲三味药物组成，加入大蒜熬膏为丸。临床研究表明，青娥方能够改善绝经后OP患者的临床症状，提高骨密度，但其作用机制尚未完全明确。前期研究发现，青娥方可能通过调节骨代谢相关因子的表达，影响骨吸收和骨形成的平衡，从而发挥抗骨质疏松的作用。

FAK/SRC/p130Cas通路是近年来发现的一条与细胞黏附、迁移和增殖密切相关的信号通路，在骨吸收过程中也发挥着重要作用。整合素-αβ3在破骨细胞诱导酪氨酸磷酸化与富含脯氨酸的酪氨酸激酶2及非受体依赖型蛋白酪氨酸激酶Src家族中的衔接蛋白P130Crk相关的底物蛋白激活中至关重要，使骨产生吸收作用。研究表明，抑制FAK/SRC/p130Cas通路的活性，可以减少破骨细胞的形成和骨吸收功能，从而改善骨质疏松症的病理状态。因此，探讨青娥方是否通过调控FAK/SRC/p130Cas通路影响骨吸收，对于揭示其抗骨质疏松的作用机制，具有重要的理论和实践意义。

1.2国内外研究现状

青娥方作为中医治疗骨质疏松症的经典方剂，近年来受到了国内外学者的广泛关注。临床研究方面，多项随机对照试验表明，青娥方能够显著改善绝经后骨质疏松症患者的腰背痛、腰膝酸软等症状，提高骨密度。一项系统回顾分析显示，青娥丸对于OP患者骨量提高及改善中医症状有较好临床疗效。从不同OP的证型出发，多位学者探讨了青娥丸治疗绝经后OP肾虚血瘀型的疗效，发现青娥丸能够明显改善患者腰背痛和腰膝酸软等症状，降低骨代谢，提高患者骨密度或维持骨量，且用药安全性较好。

在基础研究方面，研究发现青娥方及其组方药物具有雌激素样作用，能够调节成骨细胞、破骨细胞活性，维持骨代谢平衡。青娥方中的补骨脂、杜仲、核桃仁具有补肾温阳、强筋健骨的作用，通过抑制破骨细胞雌激素受体同时活化成骨细胞雌激素受体，有利于维持骨密度和延缓骨密度的下降。补骨脂可以通过调控免疫功能抑制破骨细胞的增值与分化，杜仲内包含黄酮类等物质，具有抗骨质疏松以及镇痛作用。

FAK/SRC/p130Cas通路在骨吸收中的研究也取得了一定进展。破骨细胞的骨吸收功能依赖于其与骨基质的黏附、迁移和极化等过程，而FAK/SRC/p130Cas通路在这些过程中发挥着关键作用。整合素与骨基质结合后，激活FAK，进而激活SRC，SRC磷酸化p130Cas，形成FAK/SRC/p130Cas复合物，调节下游信号通路，促进破骨细胞的骨吸收功能。研究表明，抑制FAK/SRC/p130Cas通路的活性，可以减少破骨细胞的形成和骨吸收功能，从而改善骨质疏松症的病理状态。

然而，目前关于青娥方与FAK/SRC/p130Cas通路之间的关系尚未见报道。深入研究青娥方对FAK/SRC/p130Cas通路的调控作用，将有助于进一步揭示其抗骨质疏松的作用机制，为骨质疏松症的临床治疗提供新的理论依据和治疗策略。

1.3研究目标与内容

本研究旨在通过细胞实验、动物实验和临床研究，探讨青娥方对骨吸收的影响及其作用机制，明确FAK/SRC/p130Cas通路在其中的作用，为骨质疏松症的防治提供新的理论依据和治疗策略。具体研究内容如下：

青娥方对破骨细胞骨吸收功能的影响及机制研究：采用体外诱导破骨细胞分化模型，观察青娥方对破骨细胞形成、骨吸收陷窝数量和面积的影响。通过Westernblot、qRT-PCR等技术，检测FAK/SRC/p130Cas通路相关蛋白和基因的表达，探讨青娥方对该通路的调控作用。

青娥方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨吸收的影响及机制研究：建立去卵巢骨质疏松症大鼠模型，给予青娥方干预，通过骨密度测定、骨组织形态学分析等方法，观