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上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌耐药性及耐药基因的深度剖析与防控策略研究

一、引言

1.1研究背景

在现代养猪业中，猪源大肠杆菌（Escherichiacoli）和沙门氏菌（Salmonella）感染已成为严重威胁养猪业健康发展以及人类公共卫生安全的重要因素。

大肠杆菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性兼性厌氧菌，也是猪肠道内的常在菌。在猪群受到各种应激因素影响，如饲料品质不佳、养殖环境恶劣、长途运输、气候变化等，或者机体免疫力下降时，原本处于共生状态的大肠杆菌就可能转变为致病性大肠杆菌，引发一系列疾病。产肠毒素型大肠杆菌（ETEC）是导致仔猪腹泻的重要病原菌之一，仔猪黄痢常见于7日龄内仔猪，1-3日龄最常见，发病率能达到90%、死亡率达到50%，临床症状以排黄色或黄白色水样粪便和迅速死亡为特征。仔猪白痢主要发生于10-30日龄仔猪，发病率达到80%，死亡率达到50%，临床上以排灰白色浆状、糊状腥臭味稀粪为特征。断奶仔猪腹泻率一般在20%-30%，死亡率在2%-4%，有些猪场断奶仔猪的腹泻率可高达到70%-80%，死亡率高达15%-20%。此外，猪水肿病是由特定血清型大肠杆菌引起的一种急性、散发性、高度致死性肠毒血症，大多发生在仔猪断奶后的1-2周，病死率相对较高，临床上以全身性的水肿和神经症状为主要特征。大肠杆菌还常与其它病原如猪链球菌、副猪嗜血杆菌等混合感染，加剧疾病的发生，增加猪群的发病率和死亡率，给养猪业带来巨大的经济损失。

沙门氏菌同样是一类重要的人畜共患病原菌，属于革兰氏阴性杆菌。猪沙门氏菌病，又称仔猪副伤寒，多发生于2-4月龄仔猪。急性型常突然死亡，病程稍长者表现为体温升高（41-42℃），腹痛，下痢，呼吸困难，耳根、胸前和腹下皮肤有紫斑，多以死亡告终，病程1-4d。亚急性和慢性型表现为体温升高，眼结膜发炎，有脓性分泌物，初便秘后腹泻，排灰白色或黄绿色恶臭粪便，病猪消瘦，皮肤有痂状湿疹，病程持续可达数周，终至死亡或成为僵猪。感染沙门氏菌的猪不仅生长发育受阻，饲料转化率降低，而且可通过食物链将病菌传播给人类，引发食物中毒和食源性疾病。人类感染沙门氏菌后，主要表现为恶心、呕吐、腹泻、发热、腹痛等肠胃炎症状，严重时可导致菌血症、感染性食管炎、炎性关节病等，对人类健康造成严重威胁。

随着抗生素在养猪业中的广泛应用，猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药性问题日益严峻。为了预防和治疗猪群疾病，养殖户常常不合理地使用抗生素，包括超剂量、超疗程用药以及使用禁用抗生素等，这使得细菌的耐药性不断增强，耐药谱逐渐扩大。多重耐药菌株的出现，导致临床上治疗猪源大肠杆菌和沙门氏菌感染的难度越来越大，治疗成本不断增加，甚至出现无药可用的局面。同时，耐药菌还可能通过食物链传播给人类，对人类健康构成潜在威胁，使得原本有效的抗生素在治疗人类感染时也失去疗效。因此，深入了解猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药性及耐药基因分布情况，对于合理使用抗生素、有效防控猪群疾病以及保障人类公共卫生安全具有至关重要的意义。

1.2研究目的与意义

本研究旨在全面了解上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药性及耐药基因分布情况。通过对上海地区不同来源（如养猪场、市场和屠宰场等）的猪肠道和粪便样品进行细菌分离与鉴定，确定大肠杆菌和沙门氏菌的种类和数量。利用药敏实验检测分离菌株对多种常用抗生素的耐药性，分析其耐药谱和耐药水平。采用聚合酶链式反应法（PCR）对耐药基因进行检测，明确耐药基因的携带情况和分布特征。

本研究具有重要的理论和实践意义。在理论方面，丰富了对上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌耐药性及耐药基因的认识，为进一步研究细菌耐药机制提供了基础数据。在实践方面，研究结果可为上海地区养猪业合理使用抗生素提供科学依据，指导养殖户根据细菌耐药情况选择有效的抗菌药物，避免盲目用药，减少抗生素的滥用，从而降低细菌耐药性的产生和传播。有助于制定更加科学有效的猪源大肠杆菌和沙门氏菌感染防控策略，提高猪群的健康水平，促进上海地区养猪业的健康、可持续发展。对保障人类食品安全和公共卫生安全也具有重要意义，减少了耐药菌通过食物链传播给人类的风险，降低了人类感染耐药菌的几率，为人类健康保驾护航。

二、材料与方法

2.1样本采集

在2024年1月至2024年12月期间，从上海地区随机选取10个规模化养猪场、5个生猪交易市场和3个屠宰场。在养猪场，使用无菌棉拭子采集50头不同生长阶段（仔猪、育肥猪、母猪）猪的新鲜粪便样品，每头猪采集1份，共50份。对于肠道样品，在屠宰场采集刚屠宰的30头猪的完整肠道，无菌操作下，用剪刀剪取约5g的肠道内容物放入无菌采样袋中。在生猪交易市场，同样采用