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高效液相色谱的法第1页，共18页，星期日，2025年，2月5日一、液相色谱仪器
highperformanceliquidchromatograph第2页，共18页，星期日，2025年，2月5日液相色谱仪（2）第3页，共18页，星期日，2025年，2月5日液相色谱仪（3）第4页，共18页，星期日，2025年，2月5日液相色谱仪（4）第5页，共18页，星期日，2025年，2月5日二、高效液相色谱法的特点
featureofHPLC特点：高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。第6页，共18页，星期日，2025年，2月5日三、流程及主要部件
processandmainassemblyofHPLC1.流程第7页，共18页，星期日，2025年，2月5日2.主要部件(1)高压输液泵主要部件之一，压力：150～350×105Pa。为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性（动画）第8页，共18页，星期日，2025年，2月5日(2)梯度淋洗装置外梯度:利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。内梯度:一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。第9页，共18页，星期日，2025年，2月5日(3)进样装置流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，其结构如图所示：第10页，共18页，星期日，2025年，2月5日(4)高效分离柱柱体为直型不锈钢管，内径1～6mm，柱长5～40cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。第11页，共18页，星期日，2025年，2月5日(5)液相色谱检测器a.紫外检测器应用最广，对大部分有机化合物有响应。特点：灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小（1mm×10mm，容积8μL）；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。第12页，共18页，星期日，2025年，2月5日b.光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展；光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。第13页，共18页，星期日，2025年，2月5日
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