2026年三维设计一轮高中总复习生物同课异构-基因工程(一).pptxVIP

基因工程（一）;【2021?山东卷25.（12分）】人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入

表达载体中进行转化

和荧光检测，以确定

BCL11A蛋白结合位

点的具体位置。

相关信息如图所示。;（1）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是______，在R末端添加的序列所对应的限制酶是_______。本实验中,从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要______种酶。

（2）将构建的载体导入除去BCL11A基因的受体细胞，成功转化后，含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是________________。

（3）向培养液中添加适量的雌激素，含F1～F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F5～F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A蛋白结合位点位于________，理由是___________。;1.阐明基因工程的工具和基本操作程序，熟练掌握基础知识。

2.理解PCR基本原理及DNA聚合酶、引物的作用机理，能运用PCR原理解决生产中的实际问题。

3.训练思维能力和逻辑推理能力，提高语言表达的准确性和有效性。;考点1基因工程的基本工具;2．将目的基因（图乙）插入到载体质粒（图甲）中，试分析：;例1如图表示构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切割位点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切割位点是—↓GATC—。;总结：选择合适的限制酶的原则;考点2PCR;例2如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，如右图所示。若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅱ选用的PCR引物必须是____（从引物①②③④中选择，填编号???;【拓展】实际生产中有时还要根据需要，对扩增所需引物进行改造或重新设计,下图是某同学设计的一组引物（只标注了部分碱基序列）不合理（如下图），请说明理由。;新型冠状病毒检测常用RT-PCR技术，这是将mRNA逆转录(RT)和cDNA的PCR反应相结合的技术，具体过程如下图所示。;1.基因工程方面：

①获得目的基因。无论目的基因是从基因文库中获取、逆转录合成的还是人工合成的，都需PCR扩增后用于构建基因表达载体。

②目的基因检测。提取受体细胞中的染色体DNA或mRNA,扩增后探针杂交检测目的基因是否插入受体细胞或目的基因是否转录产生mRNA.

2.刑侦方面：扩增刑事现场提取的罪犯核酸，和嫌疑人的核酸进行比对。

3.亲子鉴定、死者遗骸鉴定等

4.遗传病诊断

5.基因组测序;1.图1所示目的基因和质粒结构，构建基因表达载体时应选用限制酶___________________。;3.右图所示质粒上有氨苄青霉素抗性基因(amp)和四环素抗性基因(tet)。若将目的基因插入限制酶BamHⅠ和SalⅠ之间，分析如何筛选含有目的基因的受体细胞。;例3【2021?山东卷25.（12分）】人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中

进行转化和荧光

检测，以确定

BCL11A蛋白结合

位点的具体位置。

相关信息如图所示。;（1）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是______，在R末端添加的序列所对应的限制酶是_______。本实验中,从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要______种酶。;（2）将构建的载体导入除去BCL11A基因的受体细胞，成功转化后，含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是________________。;;（3）向培养液中添加适量的雌激素，含F1～F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F5～F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列所