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引物相关试题题库及答案

一、单项选择题

1.引物的本质是

A.蛋白质

B.多糖

C.核酸

D.脂肪

答案:C

2.在PCR技术中,引物的作用是

A.提供模板

B.打开DNA双链

C.引导DNA聚合酶合成DNA子链

D.提供能量

答案:C

3.设计引物时,下列哪个因素一般不需要考虑

A.引物长度

B.引物的GC含量

C.引物的颜色

D.引物的Tm值

答案:C

4.以下关于引物的说法,正确的是

A.引物可以随意设计,没有任何要求

B.引物的3’端不能有发夹结构

C.引物的5’端必须与模板严格配对

D.引物越长越好

答案:B

5.用于扩增特定基因片段的引物,其序列通常与该基因片段

A.完全相同

B.完全互补

C.部分相同

D.部分互补

答案:B

6.引物合成的方向是

A.5’→3’

B.3’→5’

C.可以双向合成

D.没有固定方向

答案:A

7.在进行RT-PCR时,逆转录引物一般是

A.随机引物

B.Oligo(dT)引物

C.特异性引物

D.以上都可以

答案:D

8.引物浓度过高可能会导致

A.扩增效率降低

B.非特异性扩增增加

C.引物无法结合模板

D.PCR反应无法进行

答案:B

9.对于引物的保存,一般保存温度是

A.室温

B.4℃

C.-20℃

D.-80℃

答案:C

10.下列哪种引物设计软件比较常用

A.Word

B.Excel

C.PrimerPremier5

D.Photoshop

答案:C

二、多项选择题

1.引物设计的基本原则包括

A.引物长度适宜

B.避免引物自身互补

C.引物GC含量合理

D.引物3’端不能错配

答案:ABCD

2.以下哪些情况可能影响引物与模板的结合

A.引物序列错误

B.模板DNA质量差

C.反应体系中盐浓度不合适

D.引物浓度过低

答案:ABCD

3.在设计引物时,考虑引物的Tm值的原因是

A.确保引物在合适温度下与模板结合

B.避免引物在PCR过程中过早解链

C.保证PCR反应的特异性

D.提高引物的合成效率

答案:ABC

4.引物的来源有

A.化学合成

B.从生物体内提取

C.基因工程制备

D.自然生成

答案:AC

5.以下关于引物二聚体的说法,正确的是

A.引物二聚体会影响PCR扩增效率

B.引物二聚体是引物之间相互结合形成的

C.设计引物时应尽量避免引物二聚体的形成

D.引物二聚体对PCR结果没有影响

答案:ABC

6.引物在基因克隆中的作用有

A.确定目的基因的扩增区域

B.引导DNA聚合酶合成目的基因

C.提高基因克隆的成功率

D.直接参与基因表达调控

答案:ABC

7.影响引物合成质量的因素有

A.合成原料的纯度

B.合成仪器的性能

C.合成工艺的合理性

D.操作人员的技术水平

答案:ABCD

8.在荧光定量PCR中,对引物的要求有

A.引物特异性高

B.引物扩增效率高

C.引物不能产生引物二聚体

D.引物长度比普通PCR引物长

答案:ABC

9.引物设计过程中,可以通过哪些方法提高引物的特异性

A.增加引物长度

B.提高引物的GC含量

C.进行BLAST比对

D.避免引物与非目标序列互补

答案:ACD

10.下列哪些属于引物的应用领域

A.疾病诊断

B.基因工程

C.法医鉴定

D.生物进化研究

答案:ABCD

三、判断题

1.引物的长度越长,其与模板的结合就越稳定,所以引物越长越好。(×)

2.只要引物的序列正确,就一定能在PCR中成功扩增出目标片段。(×)

3.引物的GC含量过高或过低都可能影响PCR反应的进行。(√)

4.随机引物可以用于扩增任何已知序列的基因。(×)

5.引物在PCR反应中不会被消耗。(×)

6.设计引物时,引物的5’端可以进行一些修饰,如添加酶切位点等。(√)

7.引物二聚体只会在引物浓度过高时出现。(×)

8.不同的PCR反应体系对引物的要求是一样的。(×)

9.引物合成后不需要进行质量检测就可以直接用于实验。(×)

10.在进行引物设计时,不需要考虑物种的基因组信息。(×)

四、简答题

1.简述引物设计时对引物长度的要求及原因。

引物长度一般在18-25bp左右。引物过短,与模板的结合力弱,可能导致引物结合不特异,影响PCR扩增的特异性;引物过长,则会增加引物合成成本,同时也可能增加引物自身互补及形成引物二聚体的概率,而且在PCR反应中退火温度相应提高,可能导致引物与模板结合困难,降低扩增效率。

2.为什么引物的3’端不能有发夹结构或错配?

引物3’端若有发夹结构,会使引物自身折叠,无法正常与模板结

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