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适配体交联荧光传感器在玉米赤霉烯酮检测中的应用研究
目录
文档综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.1.1玉米赤霉烯酮污染物特性概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.1.2食品安全与健康的迫切需求．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.1.3现有检测技术及其局限性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
1.2适配体技术原理简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
1.2.1适配体分子的识别机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
1.2.2合适的适配体选择策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
1.3荧光传感技术发展概况．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
1.3.1荧光猝灭/增强信号机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
1.3.2基于传感器的检测优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
1.4本研究的目标与创新点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
相关理论与实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
2.1玉米赤霉烯酮作用机理简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
2.2适配体-生物素系统交联原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
2.2.1亲和素/链霉亲和素介导的特异性结合．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
2.2.2共价或非共价交联模式探讨．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
2.3荧光信号响应体系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
2.3.1激发源与发射波长选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
2.3.2信号放大或增强策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
2.4实验材料与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
2.5主要仪器设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
2.6实验方案设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
2.7数据处理与分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
基于适配体交联的荧光传感器构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
3.1特异性适配体的筛选与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55
3.1.1适配体筛选平台介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
3.1.2筛选指标的设定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59
3.2荧光探针分子的设计与合成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61
3.2.1活性基团与荧光团的连接．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．63
3.2.2探针分子纯化与表征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64
3.3传感器构建方案优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66
3.3.1适配体与探针比例确定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．67
3.3.2交联条件探索．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69
3.3.3关键试剂用量的确定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．70
传感器性能表征与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74
4.1传感器荧光响应特性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．77
4.1.1不同浓度为玉米赤霉烯酮的响应曲线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．78
4.1.2非特异性干扰物的交叉响应评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．81
4.
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