碳水化合物的分析检验.pptVIP

③每次用毕或使用一段时间以后,必须进行及时有效的清洗，洗涤方法有机械冲洗法和化学洗涤法。机械冲洗法是将滤器倒置，从过滤的相反方向用蒸馏水反复冲洗，如采用减压法，可提高洗涤效率。化学洗涤法是针对不同沉淀物，采用各种有效洗涤液洗涤或浸泡，再用水冲净，晾干即可。常用洗涤液的洗涤范围如下表序号沉淀物有效洗涤液1脂肪四氯化碳2蛋白质、葡萄糖盐酸、热氨水、热硫酸硝酸混合液3有机物及碳水化物热铬酸洗涤液或硝酸钾硫酸液浸泡4铜、铁化合物加有氯酸钾的热盐酸5硫酸钡100℃硫酸6汞渣热硝酸7硫化汞热王水8氯化银氨水或硫代硫酸钠溶液9铝质、硅质残渣先用2％氢氟酸，继用硫酸洗涤，立即用水冲洗至不检出酸第54页，共105页，星期日，2025年，2月5日1.原理将一定量的样液与过量的碱性铜盐溶液共热，样液中的还原糖定量地将二价铜还原为氧化亚铜，生成的氧化亚铜在酸性条件下溶解为一价铜离子，并能定量地消耗游离碘，碘被还原为碘化物，而一价铜被氧化为二价铜。剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定，同时做空白试验，根据硫代硫酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘量，从而计算出样品中还原糖含量。各步反应式如下：2Cu++I2=2Cu2++2I-I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI(三)萨氏(Somogyi)法第55页，共105页，星期日，2025年，2月5日1.碘量法(1)原理样品经处理后，取一定量样液于碘量瓶中，加入一定量过量的碘液和过量的氢氧化钠溶液，样液中的醛糖在碱性条件下被碘氧化为醛糖酸钠，由于反应液中碘和氢氧化钠都是过量的，两者作用生成次碘酸钠残留在反应液中，当加入盐酸使反应液呈酸性时，析出碘，用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，则可计算出氧化醛糖消耗的碘量，从而计算出样液中醛糖的含量。(四)其他方法简介第56页，共105页，星期日，2025年，2月5日醛糖+I2+3NaOH=醛糖酸钠+2NaI+2H2OI2+2NaOH=NaIO+NaI+H2ONaIO+NaI+2HCl=I2+2NaCl+H2O(2)适用范围本法用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖。适用于各类食品，如硬糖、异构糖、果汁等样品中葡萄糖的测定。第57页，共105页，星期日，2025年，2月5日2、砷钼酸比色法原理：还原糖含有醛基和酮基，在碱性溶液中能还原铜试剂中的二价铜成一价氧化亚铜，砷钼酸试剂中六价钼被氧化亚铜还原生成钼蓝，钼蓝溶液在560nm下的吸光度与还原糖浓度呈正比例关系。按不同程序水解，从而可测出非还原糖及淀粉含量。第58页，共105页，星期日，2025年，2月5日步骤：绘制葡萄糖标准曲线样品溶液制备水提取离心液还原糖和非还原糖测定沉淀物酸水解加铜试剂和砷钼酸试剂加铜试剂和砷钼酸试剂，比色测定酸水解后再加铜试剂和砷钼酸试剂得到还原糖含量得到非还原糖含量得到淀粉含量第59页，共105页，星期日，2025年，2月5日3、3,5-二硝基水杨酸法原理：在NaOH和丙三醇存在下，3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原糖供热后被还原生成氨基化合物。这种呈橘红色的化合物在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系。因此，利用可利用比色法测定样品中的含糖量。第60页，共105页，星期日，2025年，2月5日(一)蔗糖的测定在食品生产过程中，测定蔗糖的含量可以判断食品加工原料的成熟度，鉴别白砂糖、蜂蜜等食品原料的品质，以及控制糖果、果脯、加糖乳制品等新产品的质量指标。蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖，没有还原性，但在一定条件下，蔗糖可水解成具有还原性的葡萄糖和果糖。因此，可以用测定还原糖的方法测定蔗糖含量。对于浓度较高的蔗糖溶液，其相对密度、折光率、旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定关系，故可用物理检验法测定蔗糖的含量。本节介绍盐酸水解法。四、蔗糖和总糖的测定第61页，共105页，星期日，2025年，2月5日1.原理试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定。水解前后还原糖的差值为蔗糖水解所产生的还原糖的量，再乘以换算系数0.95即为蔗糖含量。HCLC12H22O11+H2O