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Hanbio汉恒生物技术 腺病毒载体 pHBAd-CMV-IRES-GFP pHBAd-U6-GFP 操作手册.pdf

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    腺病毒载体操作手册

    腺病毒载体操作手册

    一、实验流程

    制备腺病毒穿梭质粒，分别高纯度无内毒素抽提腺病毒穿梭质粒和骨架质粒，共转

    染293A细胞，转染后6h更换为完全培养基，培养十几天，在中间四五天左右更换一次新鲜培

    养基，然后收集细胞和1ml培液置于15ml离心管后，液氮/37度冻融三次（冻-融要彻底），

    2000rpm离心5分钟，取上清即为病毒液初代原液。连续三代反复扩增收集病毒后，行病毒的

    大量扩增，然后通过CsCl密度梯度离心-

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