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实验一•草履虫P(arameciumcaudatum)的采集、培养和观察
一、目的
初步学会草履虫的采集、培养和活体观察方法,并熟识草履虫的形态结构,而了解纤
毛虫纲的一般特征。
二、仪器和药品
显微镜,解剖镜,载玻片,盖玻片,培养缸,烧杯,表面皿,凹玻片,滴管,微吸管,
试管,脱脂棉花,擦镜纸,2%冰醋酸,1%碳酸氢钠,墨汁,蛋清,甘油,1%碘液。
三、采集和培养
1、采集
草履虫喜生活在有机质丰富的水沟或池塘中,常在水面浮游。可以选择有枯草腐烂的水
域,进行舀水采集。
草履虫的包壳常附于新鲜的稻草秆上,可取新鲜的稻草近根部1~2节,剪成1寸长,加
4~5倍水后,放在温暖、光亮处,培养一星期即可得到。
用上述方法采集的水样和培养液中,常混有其他种类的原生动物或其他的小动物,如需
要大量和纯系的草履虫,应进一步进行分离、培养。
2、培养
常用方法如下:
稻草液培养草履虫:用稻草10克,剪成1寸左右的小段,加1000毫升河水,煮沸半小
时,倾出培养液,保存于加盖容器中,待24小时后,即可用于培养。草履虫喜微碱性环境,
若培养液呈酸性,可用1%碳酸氢钠调到微碱性但(Ph不能大于7.5)。
取野外采得水样少量放在小麦面皿内,置解剖镜下,用微吸管(口径不大于0.2毫米)
吸出分离,将吸出的草履虫注入稻草培养液中培养,每毫升培养液中至少移入草履虫2个以
上,若移入虫体密度过小,培养常不易成功。因此开始时可在试管中小体积培养,待繁殖后
再逐步扩大培养。
如果要培养纯系的草履虫,在解剖镜下吸取一个草履虫,放进盛有少量培养液的凹玻片
内,上面再覆盖-•凹玻片,防止培养液干燥,待培养增繁到20~30个草履虫时,移至较大容
器中继续培养。
麦粒液培养草履虫:用5克麦粒大(麦、小麦均可)加水1000毫升,煮到麦粒裂开,
放24小时后,液汁即可用于培养。
草履虫的培养需放在有阳光的温暖地方,温度可控制在20~25e范围内,一般经一周培
养,可以得到大量的草履虫。一旦虫体繁殖过多,培养液中营养减少以及虫体排代谢产物
累计,往往引起草履虫数量的减少,以致全部死亡。因此在培养过程中每隔2~3天,用滴管
吸去底部培养液及沉淀物,然后加入等量的新鲜培养液,这样可使草履虫长期得到保存。
四、观察
在显微镜下,草履虫游动迅速,难以观察,可用下列方法限制和减缓其运动,方法如下:
(1)将少量棉花纤维均匀铺开放在载玻片上,滴上草履虫培养液,盖上盖玻片,先在低倍
镜下观察,如水多草履虫还在游动,可再用一条吸水纸在盖玻片的一侧吸去些水分,直至容
易观察为止。
2()也可将少量蛋清固定剂将(蛋清搅匀后,加等量的甘油混合即成)涂在载玻片上,然
后滴上一滴草履虫培养液,待水略干后,就可观察。
3()在使用棉花纤维时,操作者有时不能使棉花纤维均匀分布,从而影响观察,这时可用
擦镜纸代替,方法是:将擦镜纸剪成盖玻片大小的方块,取1片放在载玻片上,滴上草履虫
培养液,盖上盖玻片,在低倍镜下观察。
(4)用甲基纤维素作运动阻滞剂。低浓度的甲基纤维素溶液,混合后静置30分钟-1小时,
再加入蒸僧水45毫升,搅拌到全部均匀溶解为止。用过滤的池塘水替代蒸储水配制的甲基
纤维素溶液,能较好、地维持动物的体形。如果用于海水种类,可以过滤海水配制。使用时,
先在载玻片上滴一滴10%甲基纤维素溶液,再用微吸管移浓集的草履虫至其中央。轻轻盖
上盖玻片。
(5)多聚乙烯氧化物作运动阻滞剂。多聚乙烯氧化物分子量很大,约为5X106,但对原生
动物的毒性极小,是一种良好的运动阻滞剂,常使用的浓度为0.5-1%。
(6)硫酸锲麻醉液。低浓度的硫酸锲溶液对纤毛虫类的麻醉效果相当好,草履虫0.001%硫
酸镁溶液,15分钟后运动就停止。而且硫酸保溶液的麻醉效应是可逆的。一般可以配制0.1%
硫酸保溶液作为母液。
将培养液对光观察,在培养液的表层可见许多白色小点,这就是草履虫。草履虫似一只
倒置的草鞋,前端钝圆后端尖。它的结构包括以下几部分:
表膜:为虫体最外一层具弹性的薄膜。在倍镜下次摸表面为无数的六角形小区,若加
入30%酒精或醋酸一滴把虫杀死,则表膜的六角形小区
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