番茄SlMYB74转录激活分析及互作蛋白的初步筛选.pdfVIP

分子植物育种，2025年，第23卷，第1期，第27-33页

MolecularPlantBreol.23,No.1,27-33

研究报告

ResearchReport

番茄SIMYB74转录激活分析及互作蛋白的初步筛选

贾梦玫！郝娟！郭仰东2张喜春

1北京农学院植物科学技术学院，北京，102206;2中国农业大学园艺学院，北京，100094

*通信作者,xichunzhang@

摘要MYB转录因子在植物胁迫应答机制中具有重要的调控作用。本研究利用课题组前期已构建的番

茄cDNA文库，采用酵母双杂交技术筛选SIMYB74基因的互作蛋白，进一步探究SIMYB74参与低温胁迫的

调控机制。结果显示，本研究构建了诱饵载体pGBKT7-SIMYB74,检测出其无毒性且具有自激活活性；筛选

发现3-AT浓度为175mmol/L时，抑制其自激活效果最好，以此降低试验结果假阳性率；筛库后初步得到9

个与SIMYB74互作的候选蛋白。互作蛋白的GO分析结果表明，MYB74可能参与转录调控、盐胁迫响应、

低温响应、抵御昆虫、木质素合成等生物学过程。从中选择SIMYB14、SIMYB60进行点对点验证，结果显示

两个蛋白均与SIMYB74相互作用。本研究为进一步探究SIMYB74环境胁迫应答调控机制提供帮助。

关键词番茄；SIMYB74;酵母双杂交；互作蛋白

TranscriptionalActivationAnalysisandPreliminaryScreeningof

InteractionProteinsofSIMYB74fromTomato

GuoYangdong

JiaMengmei1HaoJuan1(ZhangXichun1*

1CollegeofPlantScienceandTechnology,BeijingAgriculturalUniversity,Beijing,102206;2CollegeofHorticulture,ChinaAgriculturalUniversity,

Beijing,100094

*Correspondingauthor,xichunzhang@

DOI:10.13271/j.mpb.023.000027

AbstractMYBtranscriptionfactorsplayanimportantregulatoryroleinplantstressresponsemechanism.In

thisstudy,thetomatocDNAlibrarypreviouslyconstructedbyourresearchgroupwasusedtoscreentheinterac-

tionproteinsofSlMYB74genebyyeasttwo-hybridtechnology,soastofurtherexploretheregulatorymechanism

ofSIMYB74involvedinlowtemperaturestress.ThebaitvectorpGBKT7-SIMYB74wasconstructedandproved

tobenontoxicandself-activated.Whentheconcentrationof3-ATwas175mmol/L,theinhibitionofself-activa-

tionwasthebest,therebyreducingthefalsepositiverateofthetestresults.Ninecandidateproteinsinteracting

withSIMYB74werepreliminarilyobtainedafterscreening.GOanalysisoftheinteractionproteinsshowedthat

MYB74maybeinvolvedinregulationoftranscription,responsetosaltstress,responsetocold,defenseresponse

toinsect,suberinbiosyntheticprocessa