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pcr上岗证考试题及答案湖南省

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的基本原理是（）

A.基因重组

B.核酸分子杂交

C.体外酶促合成特异DNA片段

D.体内酶促合成特异DNA片段

答案：C

2.TaqDNA聚合酶的最适反应温度是（）

A.37℃

B.55℃

C.72℃

D.94℃

答案：C

3.在PCR反应中，引物的作用是（）

A.提供起始的3-OH

B.提供起始的5-OH

C.提供起始的磷酸基团

D.提供起始的核苷酸

答案：A

4.PCR反应中，dNTP的浓度一般为（）

A.0.1-0.2mmol/L

B.0.2-0.5mmol/L

C.0.5-1mmol/L

D.1-2mmol/L

答案：A

5.以下哪种物质不是PCR反应的成分（）

A.模板DNA

B.RNA聚合酶

C.引物

D.Taq酶

答案：B

6.PCR产物的特异性取决于（）

A.引物

B.Taq酶

C.dNTP

D.模板

答案：A

7.在进行PCR反应时，防止污染的措施不包括（）

A.分区操作

B.使用一次性耗材

C.增加模板量

D.严格遵守操作规程

答案：C

8.对于高GC含量的模板进行PCR扩增时，可采取的措施是（）

A.提高退火温度

B.降低退火温度

C.增加延伸时间

D.减少延伸时间

答案：B

9.实时荧光定量PCR的原理主要基于（）

A.荧光染料与双链DNA结合

B.特异性探针与模板结合

C.以上都是

D.以上都不是

答案：C

10.PCR反应的循环次数一般为（）

A.10-20次

B.20-30次

C.30-40次

D.40-50次

答案：C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系包括（）

A.模板DNA

B.引物

C.Taq酶

D.dNTP

E.缓冲液

答案：ABCDE

2.影响PCR反应的因素有（）

A.引物设计

B.模板质量

C.酶的活性

D.反应温度

E.dNTP浓度

答案：ABCDE

3.以下哪些属于PCR的应用（）

A.基因克隆

B.遗传病诊断

C.病原体检测

D.基因表达分析

E.肿瘤研究

答案：ABCDE

4.防止PCR污染的有效方法有（）

A.物理隔离

B.紫外线照射

C.使用UNG酶

D.严格操作规范

E.设立阴性对照

答案：ABCDE

5.引物设计的原则包括（）

A.特异性

B.长度合适

C.GC含量适中

D.避免二级结构

E.引物间不能互补

答案：ABCDE

6.在PCR反应中，以下哪些情况可能导致非特异性扩增（）

A.引物浓度过高

B.退火温度过低

C.模板纯度不够

D.循环次数过多

E.Taq酶活性过高

答案：ABCD

7.荧光定量PCR的优点包括（）

A.特异性强

B.灵敏度高

C.可定量分析

D.自动化程度高

E.重复性好

答案：ABCDE

8.对于低拷贝模板进行PCR扩增时，可采用（）

A.增加循环次数

B.增加模板量

C.优化引物

D.使用高保真酶

E.提高退火温度

答案：ABC

9.以下关于PCR的描述正确的是（）

A.是一种体外核酸扩增技术

B.可在短时间内大量扩增目的DNA片段

C.具有高灵敏度和特异性

D.需要特定的引物

E.不同的反应体系和条件适用于不同的模板

答案：ABCDE

10.以下哪些是PCR技术发展的新方向（）

A.数字PCR

B.多重PCR

C.原位PCR

D.反转录PCR

E.微滴式数字PCR

答案：ABCDE

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应可以直接以RNA为模板进行扩增。（）

答案：错误

2.Taq酶具有5-3外切酶活性。（）

答案：错误

3.引物越长，特异性越高，但过长会影响扩增效率。（）

答案：正确

4.在PCR反应中，提高退火温度可增加特异性。（）

答案：正确

5.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）

答案：错误

6.PCR产物的量与起始模板量呈线性关系。（）

答案：错误

7.实时荧光定量PCR只能检测DNA。（）

答案：错误

8.防止PCR污染只需要在实验后进行清洁即可。（）

答案：错误

9.只要引物设计合理，就不会出现非特异性扩增。（）

答案：错误

10.对于高AT含量的模板，退火温度应适当提高。（）

答案：错误

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR的基本步骤。

答案：PCR基本步骤包括变性（94℃左右使