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2025/07/20

单克隆抗体制备的基本原理

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CONTENTS

目录

01

单克隆抗体概述

02

单克隆抗体制备过程

03

关键技术与方法

04

单克隆抗体的应用领域

05

单克隆抗体的未来展望

单克隆抗体概述

01

定义与特性

单克隆抗体的定义

单克隆抗体是由单一的B细胞克隆产生的，具有高度特异性的抗体。

高度特异性

单克隆抗体能精确识别并结合到特定的抗原表位，用于疾病诊断和治疗。

均一性

由于单克隆抗体来源于单一细胞，因此它们在结构和功能上是均一的，保证了实验结果的可靠性。

单克隆抗体的重要性

疾病诊断

单克隆抗体在疾病诊断中具有高特异性，用于检测癌症等疾病标志物。

治疗应用

单克隆抗体用于治疗多种疾病，如癌症、自身免疫疾病，提高治疗效果和安全性。

单克隆抗体制备过程

02

免疫原的选择与处理

选择合适的免疫原

选择免疫原时需考虑其免疫原性，通常选择纯化蛋白或合成肽段以提高特异性。

免疫原的纯化与鉴定

免疫原需经过纯化处理以去除杂质，确保其纯度和活性，后续通过SDS等方法进行鉴定。

免疫原的偶联与修饰

为了增强免疫原的免疫反应性，常将其偶联到载体蛋白上，并可能进行化学修饰以提高其抗原性。

动物免疫与细胞融合

选择合适的实验动物

通常选用小鼠进行免疫，通过注射特定抗原多次激发其免疫反应。

抗原的制备与纯化

制备高纯度的抗原，确保免疫后能产生特异性高的抗体。

细胞融合技术

将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，形成能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。

筛选与克隆化培养

通过ELISA等方法筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，并进行克隆化培养以获得单克隆抗体。

杂交瘤细胞的筛选与克隆化

筛选杂交瘤细胞

通过HAT培养基筛选，只有成功融合的杂交瘤细胞能在其中生长，从而被选出。

克隆化培养

将筛选出的杂交瘤细胞进行有限稀释或软琼脂克隆化，确保每个克隆来源于单一细胞。

单克隆抗体的鉴定

通过ELISA等方法检测培养上清，筛选出能特异性结合抗原的单克隆抗体产生细胞。

单克隆抗体的生产与纯化

疾病诊断

单克隆抗体在疾病诊断中具有高特异性，能够准确识别疾病标志物，提高检测的准确性。

治疗应用

单克隆抗体用于治疗多种疾病，如癌症、自身免疫疾病，因其靶向性强，副作用相对较小。

关键技术与方法

03

细胞融合技术

单克隆抗体的定义

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的抗体，具有高度的特异性和均一性。

单克隆抗体的均一性

由于单克隆抗体来源于单一细胞系，因此它们在结构和功能上是完全相同的。

单克隆抗体的特异性

单克隆抗体能精确识别并结合到特定的抗原表位，这是其在疾病诊断和治疗中应用的关键。

克隆化技术

筛选特定杂交瘤细胞

通过ELISA等方法筛选出能产生目标抗体的杂交瘤细胞，确保其特异性。

克隆化培养过程

将筛选出的杂交瘤细胞进行有限稀释或软琼脂克隆化，以获得单克隆细胞群。

杂交瘤细胞的稳定性测试

对克隆化后的细胞进行连续培养和冻存复苏，测试其分泌抗体的稳定性和持久性。

抗体筛选技术

选择合适的免疫原

选择免疫原时需考虑其免疫原性，如蛋白质抗原需纯度高，以确保产生特异性抗体。

免疫原的化学修饰

通过偶联剂将免疫原与载体蛋白结合，增强其免疫反应性，提高抗体产量。

免疫原的剂量与注射方式

确定合适的免疫剂量和注射途径，如皮下或腹腔注射，以优化免疫效果。

抗体纯化技术

疾病诊断

单克隆抗体在疾病诊断中具有高特异性，可用于检测癌症等疾病标志物。

治疗应用

单克隆抗体用于治疗多种疾病，如癌症、自身免疫疾病，提高了治疗的精准度和效果。

单克隆抗体的应用领域

04

医学诊断

选择合适的实验动物

通常选用小鼠进行免疫，通过注射抗原多次激发其免疫系统产生特异性抗体。

提取并培养B细胞

从免疫后的小鼠脾脏中提取B细胞，这些细胞能够产生针对特定抗原的抗体。

细胞融合技术

将B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，这些细胞能无限增殖并产生单克隆抗体。

筛选和克隆化

通过ELISA等方法筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，并进行克隆化培养以获得单克隆抗体。

疾病治疗

单克隆抗体的定义

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的抗体，具有高度的特异性和均一性。

单克隆抗体的均一性

由于单克隆抗体来源于单一细胞系，因此它们在结构和功能上是完全相同的。

单克隆抗体的特异性

单克隆抗体能精确识别并结合到特定的抗原表位，这是其在疾病诊断和治疗中应用的关键。

生物研究工具

01

选择合适的抗原

选择免疫原时需考虑其免疫原性，通常选择纯度高、特异性强的抗原以提高单克隆抗体的效价。

02

抗原的纯化

通过层析、电泳等技术对抗原进行纯化处理，确保免疫反应的特异性和一致性。

03

抗原的偶联与标记

将抗原与载体蛋白偶联或进行荧光标记，增强其免疫原性，便于后续的检测和分析。

单克隆抗