微生物遗传变异与菌种保藏.pptxVIP

第八章微生物遗传变异

与菌种保藏(增加内容);本章内容：

第一节遗传的物质基础

第二节基因突变及修复

第三节基因重组

第四节微生物诱变育种

第四节菌种的衰退、复壮及保藏;第一节基因突变与诱变育种;一基因突变;（一）突变类型;3、致死性突变型

（合成核心性酶的基因发生了突变，则表现出致死突变）

条件致死突变型——

如突变为温度敏感型突变（37℃死，25℃活）

4、其它突变型

毒力突变、糖发酵突变、产量、产品突变等。;（二）突变的特点;（三）基因突变自发性及不对应性的证明

（自学）;;（1）抗性细胞的出现，是在接触噬菌体之前

（2）喷上噬菌体，仅起裁减野生型和鉴别抗性株作用；

（3）于甲方高度彷徨，阐明突变是随机的。;平板影印培养实验;（1）突变与噬菌体无关；

（2）涂布使抗性菌株均匀分布；

（3）抗性突变可在任何时间发生，与噬菌体存在无关。

以上实验用统计学原理间接证明。;;（1）实验表明：从未接触str的菌株可发生抗性突变，分离可得到纯的str菌株。

（2）由此表明：突变是自发的与环境不对应的。;（四）基因突变的机制（自学）;（五）DNA损伤及修复（自学）;二突变与育种;（一）自发突变与生产育种;（1）自发突变(spontaneous)：

在非人为的状况下由于遗传物质的微小变化

引发的性状变异。

（2）因素可能是：

1）环境因素；

2）本身有毒产物的积累；

3）互变异构效应；;二诱变育种;;（1）概念：凡能提高基因突变频率的理化因素。

（2）种类：

1）物理因子（phisicalagents)

物理诱变剂：U.V、χ、γ、快中子、超声波等。

2）化学因子(chemicalagents)

3）转座子(transposableelements);?烷化剂(alkylatingagents)：

如：氮芥、硫酸二乙酯、亚硝基胍、NTG等

机制：将烷烃加在含氮碱基上，变化氢键性质。;;3.诱变程序：;4诱变的重要环节;（1）诱变剂的选择：

1）理解诱变剂的性质、作用机理和使用办法。

2）解决方式

A、单一因子解决：先后使用

B、复合因子解决：两种以上因素同时使用单一

因子重复使用。

3）解决剂量：测致死率。

办法：平板菌落计数法、纸片法

普通杀菌率为70%左右。;（2）出发菌株：

育种的原始菌种应含有：

1）对诱变剂的敏感性高；

2）生产中选育过的自发变异菌株；

3）本身含有某些有利性状；

4）对代谢产物有一定积累；

5）已经发生过某些变异。;（3）单孢子或单细胞悬液的制备

1）必要性：单细胞可均匀地接触诱变剂，避免出现不纯的菌落——菌种退化。

2）制备：

物理诱变剂——生理盐水（0.85%NaCl)

化学诱变剂——缓冲液。

3）办法：三角瓶内加φ0.5cm玻璃珠打散10-15min;加０.3%吐温80（表面活性剂），用无菌脱脂棉过滤。

4）浓度：细菌、放线菌108个/ml

霉菌、酵母菌106个/ml;（4）设计和采用效率高的筛选方案和办法

1）初筛：平板上做定性、半定量的测定，观察突变株的生理效应范畴。

办法

梯度平板法（抗性菌株）

纸片法（抗性菌株）

透明圈法（淀粉酶产生菌株等）

变色圈法（氨基酸生产菌株）

2）复筛：（见P250）

较精确的生物化学分析办法—做摇瓶测定;三、营养缺点型的筛选;（一）概念;1.三种遗传型个体;2、筛选用的培养基;（二）筛选办法;1.诱变解决（同前);2.auxo的浓缩：;3.auxo的检出;4.auxo的鉴定;5.auxo的应用;第二节基因重组;基因重组

把两个不同