荧光光谱仪原理及其使用方法.pptVIP

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荧光分光光度计原理和结构第31页,共50页,星期日,2025年,2月5日荧光分光光度计示意图发射单色器PMPM分束器光源激发单色器——光闸样品池第32页,共50页,星期日,2025年,2月5日光源:氙灯、高压汞灯、激光;样品池:石英(低荧光材料);两个单色器:选择激发光单色器;分离荧光单色器;两个检测器:光电倍增管。主要部件第33页,共50页,星期日,2025年,2月5日RF-5301PC光路图第34页,共50页,星期日,2025年,2月5日仪器性能高水平灵敏度:蒸馏水的拉曼峰S/N比为150以上(EX350nm,狭逢5nm)狭逢10nm拉曼峰S/N>600第35页,共50页,星期日,2025年,2月5日利用先进的直流式长驱动机构,可及为迅速的得到理想的光谱可进行高速光谱监控,最高扫描速度5500nm/min波长范围:220-900nm及0次狭逢:1.5、3、5、10、15、20nm6档及激发6nm半高波长精度:±1.5nm波长扫描速度Survey,Super,VeryFast,Medium,Slow,VerySlow的7段转换;Survey,约5,500nm/min.Super约3,000nm/min.仪器性能第36页,共50页,星期日,2025年,2月5日功能强大、操作简便的软件系统功能:激发光谱、荧光、同时光谱测定定量分析(1-3次标准曲线)时间扫描—动力学第37页,共50页,星期日,2025年,2月5日只需打开自动检索最佳激发光和荧光波长从瑞利散射、拉曼散射及2次光中自动判断出荧光使复杂的波长设置简单化检索最佳的激发光和荧光波长第38页,共50页,星期日,2025年,2月5日四则运算数据变换(1-4介导数,倒数,对数)曲线平滑峰值检测面积计算活度值计算等计算平均值多样的数据处理第39页,共50页,星期日,2025年,2月5日扩展功能和附件大样品室可安装各种样品池架LC流动样品池偏光装置等第40页,共50页,星期日,2025年,2月5日丰富的任选附件:单一恒温样品池(带搅拌器)该部件在恒温状态下搅拌试样,进行测定,最适合浮游细胞的荧光测定。利用恒温水的循环,可使样品池恒温化。搅拌器的速度可调节恒温水循环装置使用温度范围:室温—850C

温度调节精确度:+0.050C

泵的流量:最大15L/18L/min(50/60Hz)

容器的容量:约6.8L第41页,共50页,星期日,2025年,2月5日恒温四连池架利用恒温水的循环,一次可使4个样品池恒温化。适用的温度范围:50C--800C微量样品池装置取400ul的少量试样就能测定。试样可以放入与四面研磨样品池大小(10mm)的槽中,安装在样品池架上进行测定。第42页,共50页,星期日,2025年,2月5日测定偏光的辅助装置

(用于紫外可见光或只用于可见光)利用荧光偏光度的测定获得关于分子的大小、流动性及分子周围环境的信息。高灵敏度池架第43页,共50页,星期日,2025年,2月5日固体(粉末)样品架固体、粉末样品,甚至样品池中的溶液也能用反射方式进行荧光测定。高台样品架第44页,共50页,星期日,2025年,2月5日LC流动样品池(12ul)用于高速液相色谱分析的高灵敏度分光荧光监控。自由选择激发光波长和荧光波长,可进行有选择的检测。LC流动样品池(120ul)用于分析邻苯二酚胺。使用内容积120ul的散射光少的双面反射型石英微型的流动样品池。第45页,共50页,星期日,2025年,2月5日光电倍增管换用光电倍增管,可进行900nm以内的荧光光谱的测定。直径8mm的试管架可以安装试管第46页,共50页,星期日,2025年,2月5日荧光应用领域—生命科学氨基酸、缩氨酸、蛋白质、脂质、糖类、维生素、辅酶、胺类等(1) 定性、定量(2) 研究酶反应:分析研究基质、辅酶、蛋白质(色氨酸、3-对羟基苯基丙氨酸)的反应机理(3) 抗原、抗体反应(4) 研究蛋白质-蛋白质,核酸-蛋白质,糖-蛋白质的相互作用(5) 利用荧光检验(Fura-2等),分析细胞内离子(Ca2+等)(6) 分析神经传递物质(苯邻二酚胺等)(7) 研究核酸(8) 研究生物膜第47页,共50页,星期日,2025年,2月5日荧光应用领域—食品科学氨基酸、蛋白质、脂质、碳水化合物、维生素、辅酶、抗生物质,食品添加物(调味料、防酸化剂等),食物油(植物油、动物

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