抗原抗体反应 凝胶免疫电泳技术(免疫学检验课件).pptxVIP

2025/07/13

免疫学检验技术

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CONTENTS

目录

01

抗原抗体反应基础

02

凝胶免疫电泳技术

03

免疫学检验的应用

04

免疫学检验的挑战与展望

抗原抗体反应基础

01

抗原抗体反应原理

抗原的特异性结合位点

抗原表面的特定区域称为表位，能与抗体的可变区特异性结合。

抗体的结构与功能

抗体由两条轻链和两条重链组成，具有识别和结合抗原的高亲和力。

免疫球蛋白类别

根据抗体的结构和功能差异，免疫球蛋白分为IgG、IgM等多种类别。

抗原抗体复合物的形成

当抗体与抗原结合后，形成抗原抗体复合物，触发免疫应答或中和作用。

反应类型与特点

凝集反应

凝集反应是抗原抗体结合后，导致颗粒状抗原聚集的现象，如血型鉴定中的ABO血型测试。

补体结合反应

补体结合反应涉及抗体、抗原和补体系统，可导致细胞膜破坏，常见于某些传染病的诊断。

影响因素分析

温度对反应的影响

温度升高可加速抗原抗体结合，但过高温度可能导致抗体变性，影响反应效率。

pH值对反应的影响

抗原抗体反应在中性pH值下最为理想，酸碱度变化可影响蛋白质结构，进而影响反应。

离子强度对反应的影响

高离子强度环境可能抑制抗原抗体反应，因为离子可与蛋白质表面电荷相互作用。

凝胶免疫电泳技术

02

技术原理概述

电泳分离原理

凝胶免疫电泳利用电场力使带电分子在凝胶中迁移，根据分子大小和电荷差异实现分离。

抗体-抗原特异性结合

在凝胶中，抗体与特定抗原结合形成复合物，通过电泳迁移率的变化来检测特定蛋白质。

凝胶电泳类型

聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）

PAGE用于分离蛋白质和核酸，因其高分辨率和多样的凝胶浓度选择而广泛应用于实验室。

琼脂糖凝胶电泳

常用于DNA片段的分离和分析，琼脂糖凝胶因其简便和成本效益而成为分子生物学的常用工具。

淀粉凝胶电泳

淀粉凝胶电泳是一种较老的技术，主要用于分离和鉴定酶和其他蛋白质，尽管现在使用较少，但曾是重要的研究手段。

实验操作步骤

特异性结合

抗原与抗体的特异性结合是免疫反应的基础，如流感病毒抗体与特定病毒表面蛋白的结合。

交叉反应

不同抗原间可能因结构相似而发生交叉反应，例如某些植物花粉与特定食物蛋白的交叉反应。

结果分析与应用

电泳分离原理

凝胶免疫电泳利用电场力使带电分子在凝胶中迁移，根据分子大小和电荷差异实现分离。

抗体-抗原特异性结合

在凝胶中，抗体与特定抗原结合形成复合物，通过电泳迁移率的不同来识别和分析特定蛋白质。

免疫学检验的应用

03

临床诊断中的应用

抗原的特异性结合位点

抗原表面的特定区域称为表位，抗体通过其可变区与之特异性结合。

抗体的结构与功能

抗体由两条重链和两条轻链组成，具有识别和结合抗原的高亲和力。

免疫球蛋白类别

根据抗体的结构和功能差异，免疫球蛋白分为IgG、IgM等多种类别。

抗原抗体复合物的形成

当抗体与抗原结合后，形成抗原抗体复合物，触发免疫反应的后续步骤。

研究中的应用

温度对反应的影响

温度升高通常加速抗原抗体结合，但过高温度可能导致抗体变性，影响反应效率。

pH值对反应的影响

抗原抗体反应在接近中性的pH环境中最为理想，极端的酸碱度会抑制反应。

离子强度对反应的影响

适当的离子强度有助于稳定抗原抗体复合物，过高或过低的离子浓度可能干扰反应。

技术发展趋势

特异性结合

抗原与抗体的特异性结合是免疫反应的基础，如流感病毒抗体与特定病毒株的结合。

交叉反应

不同抗原间可能因结构相似而发生交叉反应，例如某些植物花粉与特定食物的交叉反应。

免疫学检验的挑战与展望

04

当前面临的问题

电泳分离原理

凝胶免疫电泳利用电场力使带电分子在凝胶中迁移，根据分子大小和电荷差异进行分离。

抗体-抗原特异性结合

此技术中抗体与抗原特异性结合，形成免疫复合物，通过凝胶电泳分离后可识别特定蛋白。

技术创新与改进

01

聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）

PAGE用于分离蛋白质和核酸，因其高分辨率和可调节的孔隙度而广泛应用于分子生物学。

02

琼脂糖凝胶电泳

常用于DNA片段的分离和分析，因其操作简便和成本低廉而成为分子克隆实验的首选。

03

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）

用于蛋白质分子量的测定，通过SDS使蛋白质变性并根据大小进行分离，是蛋白质研究的基础技术。

未来发展方向

电泳分离机制

凝胶免疫电泳利用电场力使带电分子在凝胶中迁移，根据分子大小和电荷差异实现分离。

抗体-抗原特异性结合

在凝胶中，特定的抗体与抗原结合，形成可见的条带，用于检测和分析特定蛋白质或抗原。

THEEND

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