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实验一生理学实验方法与生物机能实验系统操作
【目的要求】
1、了解生理学实验的基本操作技术;
2、了解生理学常用实验器械,熟悉并掌握BL-420生物机能实验系统的使用。
3、学习解剖生理学实验报告的写作。
【实验内容】
一、生理学实验方法
1、实验动物的选择
2、常用动物的捕捉方法
3、常用动物的麻醉方法
(1)常用的麻醉剂
(2)常用麻醉给药途径
4、用动物的固定方法
5、常用手术的基本操作
二、BL-420生物机能实验系统的操作
BL-420生物机能实验系统是配置在微机上的4通道生物信号采集、放大、显示、记录
与处理系统。它具有记录仪+示波器+放大器+剌激器+心电图仪等传统的实验仪器的全部功
能。可记录动作电位、神经放电、肌电、脑电、心电、慢速电信号、压力、张力、呼吸、温
度以及液滴计数等信号。可输出电压、电流用于刺激。由以下三部分构成:
1.微型计算机。
2.BL-420生物信号采集、放大、A/D转换及刺激输出等多功能硬卡和前面板。
3.BL-420生物信号显示与处理软件。
实验二坐骨神经-腓肠肌标本与坐骨神经标本的制备
【目的要求】
学习两栖类的毁髓方法;掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
【实验原理】
两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物近似,但其离体组织所需的生活
条件比较简单,易于控制和掌握。在生理实验中常用蟾蜍或蛙的离体组织或器官作为实验标
本。如用蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律及骨骼肌收
缩特点等。因此,制备坐骨神经腓肠肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技能。
【材料与器械】
蟾蜍或蛙、任氏液、蛙类手术器械(普通剪刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、金
属探针)、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、小烧杯、锌铜弓等。
【实验步骤】
1、破坏脑和脊髓(双毁髓)
取蟾蜍一只,用自来水冲洗干净(勿用手搓)。左手握住蟾蜍,使其背部向上,用大拇
指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺
1
入椎管(图2-1)。然后将探针改向前刺入颅腔内,左右搅动探针2~3次,捣毁脑组织。如
果探针在颅腔内,应有碰及颅底骨的感觉。
再将探针退回至枕骨大孔,使针尖转向尾端,捻动探针使其刺入椎管,捣毁脊髓。此时
应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是,进针时有一定的阻力,而且随着进针蟾蜍出
现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全,蟾蜍下颌呼吸运动消失,四肢完全松软,
失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动,退出椎管。如蟾蜍仍有反射活动,表示脑和脊
髓破坏不彻底,应重新破坏。
图2-1捣毁蟾蜍脑和脊髓
2、剪除躯干上部、皮肤及内脏
用左手捏住蟾蜍的脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、腹肌、脊柱一并剪断(图
2-2),然后左手握住蟾蜍的后肢,紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去(注意避开坐骨神经),
并剪去肛门周围的皮肤,留下脊柱和后肢(图2-3)。
图2-2横断脊柱
图2-3剪除躯干上部及内脏
3、剥皮
一只手捏住脊柱的断端(注意不要捏住脊柱两侧的神经),另一只手捏住其皮肤的边缘,
向下剥去全部后肢的皮肤(图2-4)。将标本放在干净的任氏液中。将手及使用过的探针、
剪刀全部冲洗干净。
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图2-4剥去皮肤
4、分离两后肢
用镊子取出标本,然后沿正中线用粗剪刀将脊柱及耻骨联合中央剪开两侧下肢(注意
勿伤坐骨神经),并完全分离。将两下肢标本置于盛有任氏液的培养皿内备用。将其中一半
后肢标本用于坐骨神经-腓肠肌标本的制作,另一半用于坐骨神经标本的制作。
5、制备坐骨神经腓肠肌标本
(1)游离坐骨神经
用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神
经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内找到坐骨神经,用玻璃分针仔细剥离,
边剥离边剪断坐骨神经所有分支,将神经一直游离到腘窝。用金冠剪剪去多余
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