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紫外分光光度计项目一

能力目标学习要求与目标1.具有识别紫外分光光度计结构组成的能力。2.具有根据质量标准，采用紫外分光光度计分析检验的能力。知识目标1.掌握紫外分光光度计的原理、基本组成与作用。2.掌握分光光度计的分析方法和操作过程。素质目标1.培养诚实守信、团结协作、爱岗敬业精神；2.培养安全、环保、健康生产意识；3.培养严谨的工作态度及质量意识，具备工程管理能力；4.培养分析问题和解决问题的能力；5.创新能力培养等。紫外分光光度计

1.6紫外分光光度分析方法一、定性鉴定紫外吸收光谱可用于有机化合物的分析和检定；同分异构体的鉴别；物质结构的测定等。

1.6紫外分光光度分析方法1、定性分析定性分析：吸收光谱的特征（形状和?max）（注意：UV吸收光谱通常只有2～3个较宽的吸收峰，单根据UV谱不能完全决定物质的分子结构，尚须与IR、NMR、MS以及其它化学的和物理的方法共同配合起来才能得出可靠结论。UV谱相同，两种化合物不一定相同；但UV谱不同，则可以大体说明非同一物质。）

1.6紫外分光光度分析方法2、有机化合物分子结构的推断3、纯度检查痕量杂质，如甲醇或乙醇中的杂质苯。4、计算不饱和有机化合物吸收波长（）的经验规则。

1.6紫外分光光度分析方法二、定量分析定量分析：一般选?max测吸收程度（吸光度A）1、单组分体系（1）工作曲线法 采用一定容积的容量瓶（25ml、50ml、100ml）配一系列标准溶液，分别测定其吸光度。

1.6紫外分光光度分析方法以浓度C为横坐标，以吸光度A作纵坐标，在坐标纸上绘制曲线（一般为一条通过原点的直线），称它为工作曲线或标准曲线。①基本原理（显色）例：邻菲罗啉（邻二氮菲）分光光度法测铁亚铁离子与邻菲罗啉在pH值2～9（pH值5～6最佳），能生成橙红色配合物。

1.6紫外分光光度分析方法②标准溶液的配制配制一系列标准溶液，取50mL容量瓶8只，准确吸取Fe3+标准溶液0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL及Fe3+试液5.00mL（2份），再于各容量瓶中分别加入盐酸羟胺、HAc-NaAc缓冲溶液、邻二氮菲。

1.6紫外分光光度分析方法③吸收曲线的绘制以含Fe3+标准溶液0mL的为参比，含Fe3+标准溶液6.00mL为待测试液，在分光光度计上从波长450~550nm间，每隔10nm测定一次吸光度，在最大吸收波长左右，每隔2nm测定一次吸光度。以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制吸收光谱曲线，并找出最大吸收波长λmax。

1.6紫外分光光度分析方法④标准曲线的绘制 取配制好的一系列标准溶液，在最大吸收波长处测定其吸光度，以标准溶液浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制工作曲线。

1.6紫外分光光度分析方法⑤样品的测定 测出样品溶液的吸光度Ax，在工作曲线上找出相应的Cx(或mx或Vx)。从而求出样品中待测物的含量。

1.6紫外分光光度分析方法(2)比较法当被测样品数量少，且吸光度A与浓度c的线性比列关系甚佳，可采用比较法定量。根据朗伯-比尔定律，因测定的是同一种样品，所以ε相同，用同一种型号的比色皿，则比色皿厚度b相同，此时，可由朗伯-比尔定律得：